工业化生产蛋白质时进行纯化一般采用什么方法合适？

酶的粗纯化和精纯化方法有哪些？

传统的海带多糖的提取方法包括：热水提取法、酶提取法、碱提取法，而这些提取方法都存在一定的缺陷。热水提取的方法采用的温度是70～80℃，耗能多，提取时间长。酶提取的方法提取的时间长，工业生产需要使用的酶量大，不经济。 碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法，但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。因此寻找合适的提取方法来降低能耗，提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。为达到这一目的，本研究采用超声波方法来提取海带多糖，随后对其理化性质和生物学活性进行检测，并与传统方法进行比较，以期得到海带多糖提取的最佳方法。 首先采用了传统方法来提取海带多糖，获得的多糖测定其理化性质。随后对影...全部

  传统的海带多糖的提取方法包括：热水提取法、酶提取法、碱提取法，而这些提取方法都存在一定的缺陷。热水提取的方法采用的温度是70～80℃，耗能多，提取时间长。酶提取的方法提取的时间长，工业生产需要使用的酶量大，不经济。
  碱提取法是现在工业提取海带多糖的主要方法，但是碱提取方法会造成多糖生物活性的降低。因此寻找合适的提取方法来降低能耗，提高海带多糖的提取率以及活性变得越来越重要。为达到这一目的，本研究采用超声波方法来提取海带多糖，随后对其理化性质和生物学活性进行检测，并与传统方法进行比较，以期得到海带多糖提取的最佳方法。
   首先采用了传统方法来提取海带多糖，获得的多糖测定其理化性质。随后对影响超声波提取多糖的5个因素进行研究，即：超声频率、物料比、时间、温度以及pH。通过对单因素的研究获得正交试验的基本信息，最终选定物料比、时间、温度和pH作为正交试验L(3)的四个因子，进行这些因子3个水平上的研究。
  获得九种多糖后，测定他们的糖含量、硫酸基含量以及糖醛酸的含量，同时测定它们粘度以及分子量分布情况。通过研究计算获得超声波提取多糖的最佳方法，即：ABCD。使用该方法重新提取多糖，检测其各项理化指标，并与传统方法比较显示，超声波提取海带多糖在多糖提取能力上与水和酶的提取能力相当，超过545mg，远远高于碱提取法；从粘度和分子量分布看，超声波提取的海带多糖的小分子量多糖高于传统方法提取的海带多糖，在使用MW100000的超滤膜时，多糖的透过滤接近40﹪；经硫酸基含量分析得知该提取方法获得的海带多糖的硫酸基含量最高，达到9﹪，高于传统提取方法，而硫酸基含量的高低以及硫酸基在糖链上的位置与海带多糖的生物活性密切相关，可得知超声波提取海带多糖的生物活性理论上应该高于传统方法。
   气相色谱分析结果表明，4种提取方法获得的组成海带多糖的单糖的成分相同，含量也基本相同。4种海带多糖经DEAE-23离子交换纤维素分离纯化，结果显示分离结果也基本相同。使用高效液相色谱对四种多糖分析发现，结果发现四种多糖的分子量相差不大。
  对超声波提取的海带多糖以及传统方法提取的海带多糖进行清除自由基的试验表明，超声波提取的海带多糖对自由基的清除作用高于传统方法提取的海带多糖。使用4种方法提取的海带多糖进行抗肿瘤试验研究，结果显示除碱提取外，其余多糖对大鼠胶质瘤C6细胞均有良好的抑制作用。
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