已知某种细菌表面某蛋白质的分子量、氨基酸序列等信息,不做PCR能提纯该蛋白质吗?怎么做呢?
相当于是完全天然状态下纯化蛋白,一般需要多种纯化方式配合进行。通过分子筛先筛出某一分子量区段内的蛋白,再通过不同的离子交换柱,去分离带不同电荷的蛋白。通过几轮纯化后,最终得到目标蛋白。但是有几点需要注意:1。 细菌表面蛋白,如果是膜蛋白,需要考虑如果有跨膜结构,蛋白抽提是一个问题。如何能够抽提获得完整的蛋白,可能需要尝试不同的抽提方式的。2。经过纯化的蛋白,需要有特异检测的方法,例如如果是酶,则有酶活反应,或者有抗体,以证明分离的始终是特定的蛋白。 所以说,纯化天然蛋白不太容易做。纯化条件的摸索就需要很长时间,而且也存在纯化不出来的风险。全部
相当于是完全天然状态下纯化蛋白,一般需要多种纯化方式配合进行。通过分子筛先筛出某一分子量区段内的蛋白,再通过不同的离子交换柱,去分离带不同电荷的蛋白。通过几轮纯化后,最终得到目标蛋白。但是有几点需要注意:1。
细菌表面蛋白,如果是膜蛋白,需要考虑如果有跨膜结构,蛋白抽提是一个问题。如何能够抽提获得完整的蛋白,可能需要尝试不同的抽提方式的。2。经过纯化的蛋白,需要有特异检测的方法,例如如果是酶,则有酶活反应,或者有抗体,以证明分离的始终是特定的蛋白。
所以说,纯化天然蛋白不太容易做。纯化条件的摸索就需要很长时间,而且也存在纯化不出来的风险。收起