肉鸽病毒学检验方法有哪些？
肉鸽病毒学检验①病料的采集及处理（a)病料的采取。病毒分离的病料应采自发病早期典型的病例，病程较长的鸽不宜用于分离病毒。病禽扑杀后应以无菌操作法解剖尸体和采取病料。以禽流感为例，最好的检验病料为气管黏膜、肺、脑组织，脾、肝、肾和骨髓也可作为病毒分离的材料。 （b)病料处理。按1克组织加人5-10毫升灭菌生理盐水进行研磨。每毫升研磨液中加人青霉素和链霉素各1000单位，置4°C冰箱作用2-4小时或37°C处理1小时后，以1500转/分钟离心10分钟，取上清液作为接种材料。 （c)无菌检验。对接种材料应作无菌检验。接种营养肉汤或血液琼脂平板，观察有无细菌生长。如有细菌，则应对材料进行滤过除...全部
肉鸽病毒学检验①病料的采集及处理（a)病料的采取。病毒分离的病料应采自发病早期典型的病例，病程较长的鸽不宜用于分离病毒。病禽扑杀后应以无菌操作法解剖尸体和采取病料。以禽流感为例，最好的检验病料为气管黏膜、肺、脑组织，脾、肝、肾和骨髓也可作为病毒分离的材料。
（b)病料处理。按1克组织加人5-10毫升灭菌生理盐水进行研磨。每毫升研磨液中加人青霉素和链霉素各1000单位，置4°C冰箱作用2-4小时或37°C处理1小时后，以1500转/分钟离心10分钟，取上清液作为接种材料。
（c)无菌检验。对接种材料应作无菌检验。接种营养肉汤或血液琼脂平板，观察有无细菌生长。如有细菌，则应对材料进行滤过除菌或加入敏感抗菌药物处理。②病毒的分离培养鸡胚接种和组织细胞接种是最常用的病毒分离检查的方法。
U)鸡胚接种鸡胚接种分为绒毛尿囊腔内接种、卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种和羊膜腔接种等方法。选择6-12日之间鸡胚，经照蛋后画出气室和鸡胚位置，先用碘酒棉球、后用酒精棉球涂擦消毒接种位置及其周围。
以绒毛尿囊腔内接种为例，接种位置一般选在气室边缘上3毫米处，在该部位打孔，用1毫升或2。5毫升灭菌注射器吸取处理后的病料，插入气室下部小孔约5-10毫米，每胚注射0。1-0。2毫升，然后用融化的石蜡将蛋壳小孔封闭。
接种后检查接种后每隔6小时照蛋一次，24小时内死亡鸡胚应丢弃并做无害化处理。24小时后死亡鸡胚连同72小时未死亡鸡胚，置4°C经6-12小时后取出收获材料，同时检查鸡胚病变情况。一般情况，接种部位即为收获材料的部位。
尿囊腔接种者，无菌收取尿囊液；羊膜腔接种者，在先收取绒毛尿囊液后再用注射器吸取羊水；卵黄囊接种者，先收取尿囊液和羊水后再收取卵黄液。以上收获物应作无菌检验，防止细菌污染。(b)组织细胞培养包括组织培养、器官培养和细胞培养，应用最广的是细胞培养，以鸡胚成纤维细胞为例，简略说明细胞培养方法。
鸡胚的处理：选用10-13日龄鸡胚，在气室部用4%碘酒消毒，以无菌操作法用镊子打破气室部蛋壳，撕开壳膜、绒毛膜及羊膜后用小镊子夹住鸡胚头部取出鸡胚，置于灭菌平皿内，剪去头、翅、脚及内脏，用灭菌的Hank’s液洗净外表血液，移人另一平皿内。
将鸡胚剪成1-2毫米见方的小块，加适量Hank's液静置片刻，待组织块下沉后，吸弃上清液，将组织块悬液洗2-3次后再进行消化。消化：将胰蛋白酶溶液用碳酸氢钠溶液调至PH7。4-7。6后加人鸡胚组织块中，使胰酶含量达0。
2%左右。然后置37°C水浴或温箱中每5分钟摇动一次，直至组织块出现黏稠现象为止，一般需15-20分钟。消化后取出静置1-2分钟，吸弃胰酶液，加人适量10%犊牛血清的营养液中止胰酶作用和清洗细胞组织。
然后加适量营养液用吸管吹打分散组织块中的细胞团，如此反复几次，使细胞尽可能从组织块上脱落下来，然后进行细胞计数。分装及培养：根据细胞总数，用细胞营养液配成50万-70万个/毫升的细胞悬液，分装于培养瓶内，置37°C培养24-48小时可长成单层。
病毒接种及初步鉴定（a)接种病毒。长成单层的细胞即可接种病毒。接种时先倾弃细胞瓶中的培养液，加入待检病料。病料可事先做成2倍稀释系列，每个稀释度接种2-3瓶单层细胞，接种量以能盖住细胞层为好。
然后置37°C吸附30-60分钟，取出弃去含病毒液，加人细胞维持液，置培养箱中培养，每日观察细胞病变。（b)病毒初步鉴定。判断病毒是否增殖能应用病毒的致细胞病变效应、电子显微镜观察法、红细胞吸附法、病毒间干扰试验法及抗原性测定法进行。
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