尿蛋白测定方法有哪些？
尿蛋白的检测方法主要包括定性检查、定量检查、尿微量白蛋白测定及尿蛋白电泳分析。(1)尿蛋白定性检查1)试纸法:根据指示剂蛋白误差原理，通过尿蛋白与试纸中指示剂（如四溴酚蓝）结合产 生的颜色反应，与标准颜色对比，可以初估蛋白量。 自动化分析仪可根据颜色深浅得出蛋白定 性结果:阴性（<〇。 Ig/L)、±(0。 1 〜0。2g/L)、+ (0。2 〜lg/L)、++(l〜2g/L)、+ + +(2 〜4g/L)、 ++++(>4g/L)。 试纸条法对尿中不同蛋白质的敏感性不同，对白蛋白最敏感，对球蛋白不敏 感，如多发性骨髓瘤患者尿中可出现大量游离轻链，但试纸法检测可呈阴性。该试...全部
尿蛋白的检测方法主要包括定性检查、定量检查、尿微量白蛋白测定及尿蛋白电泳分析。(1)尿蛋白定性检查1)试纸法:根据指示剂蛋白误差原理，通过尿蛋白与试纸中指示剂（如四溴酚蓝）结合产 生的颜色反应，与标准颜色对比，可以初估蛋白量。
自动化分析仪可根据颜色深浅得出蛋白定 性结果:阴性（<〇。 Ig/L)、±(0。 1 〜0。2g/L)、+ (0。2 〜lg/L)、++(l〜2g/L)、+ + +(2 〜4g/L)、 ++++(>4g/L)。
试纸条法对尿中不同蛋白质的敏感性不同，对白蛋白最敏感，对球蛋白不敏 感，如多发性骨髓瘤患者尿中可出现大量游离轻链，但试纸法检测可呈阴性。该试验要求尿液 必须新鲜，变质尿液产生的pH变化会影响实验结果，尿pH增高可产生假阳性。
2)磺基水杨酸法(磺柳酸法）：灵敏度为0。05〜O。lg/U原理是带负电荷的磺柳酸与尿 中带正电荷的蛋白质相结合形成不溶性蛋白盐沉淀，根据浊度以加号表示。阴性:无浑浊现 象;±:轻微浑浊，隐约可见；+:明显白色浑浊，但无颗粒出现;+ + :稀薄乳样浑浊，出现颗粒； +++:乳浊，有絮片状沉淀;++++:絮状浑浊，有大凝块下沉。
本试验比较灵敏，与清蛋白、球蛋 白、糖蛋白和本周蛋白均能发生反应，美国临床和实验室标准协会将其作为干化学法检测尿蛋 白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证实验^凡混浊的标本应先离心取上清液或加几滴 稀醋酸将磷酸盐溶解后再进行比浊试验。
磺胺类、造影剂及大剂量青霉素静脉滴注（3小时 内）均可影响试验结果，尿蛋白呈假阳性。3)加热醋酸法:灵敏度为0。15g/L。原理是加热使蛋白质变性凝固，加酸使尿液酸化利 于蛋白沉淀，并使析出的碱性盐类溶解。
操作时应注意遵照加热、加酸、再加热的程序进行，根 据尿液浑浊程度及沉淀的多少可将结果判定为阴性~ ++++。如果试验中加酸过多，蛋白质微 粒获得电荷增加，可呈假阴性反应。试验时可先加1〜2滴饱和氯化钠液于尿液中，再进行 操作。
(2)尿蛋白定量检查1)双缩脲比色法:以磷钨酸乙醇溶液沉淀尿中蛋白质，在碱性介质中蛋白质与铜离子形 成紫红色络合物，与标准液比色即可得出尿中蛋白质的含量。本试验需准确记录小时尿 量，将尿液混合后再离心。
尿蛋白浓度较高时应稀释标本再操作，若疑有药物干扰时，可将尿 蛋白沉淀用无水乙醇洗涤3次再操作。2)丽春红S法:尿标本中加入三氯醋酸和丽春红染料，形成尿蛋白染料复合物，然后离 心沉淀，再加碱溶液使沉淀溶解，最后通过比色测定并计算蛋白含量。
该试验需注意，尿中血 红蛋白浓度较高时会影响结果;离心后上清液必须全部弃去，若沉淀中夹带丽春红S会影响 结果。3)考马斯亮蓝法:在酸性环境下，棕红色的考马斯亮蓝与尿蛋白通过疏水力结合，产生 蓝色化合物，光谱吸收峰改变，与标准液相比即可测出尿蛋白含量。
该方法灵敏度较高，可测 尿蛋白浓度范围为0。01 ~lg/L，需要样品量少，但不同蛋白之间差异较大。需注意的是，考马斯亮蓝溶液要定期新鲜配制，过滤后才可使用;尿标本蛋白质定性试验在（+++)以上需稀释后 测定。
(3)尿微量白蛋白检测当尿总蛋白定量在正常范围之内，而尿白蛋白排泄率达2〇〜SOOpg/min或尿白蛋白量 >30mg/d时，称为微量白蛋白尿。尿微量白蛋白常用于肾脏疾病的早期诊断，肾小球肾炎、糖 尿病性肾病及隐匿性肾炎时，尿液微量白蛋白含量升高，并且出现时间在尿蛋白定性阳性出现 之前，是肾脏疾病早期诊断的指标之一。
常用的检测方法有放射免疫测定、免疫比浊法、折射 法、酶联免疫吸附法等。(4)尿蛋白电泳分析不同的尿蛋白发生机制可导致尿蛋白的组成成分不同，因此通过电泳技术可以为临床提 供很有价值的诊断依据。如果肾小球滤过屏障完好，尿蛋白含量极低，则电泳后染色的蛋白质 条带信号极弱，以白蛋白条带为主。
如果肾小球滤过屏障异常，而肾小管重吸收功能正常，滤 过的小分子蛋白不超过肾小管的重吸收阈值，电泳后蛋白条带常显示为大分子蛋白质 (>70kD)和白蛋白。如果肾小管功能受损和滤过量过多，则会同时出现小分子量的蛋白质条 带。
目前，常用的检测方法主要有醋酸纤维薄膜电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。最后，需要注意不同测定方法对病人尿液中不同类型蛋白质检测的敏感性不同，在非选择 性蛋白尿患者，选择试纸法测定蛋白尿有可能会低估尿蛋白量。
尿蛋白定性试验简便、快捷， 可作为初步筛查使用，但由于尿蛋白定性试验影响因素较多，易出现假性结果，因此应连续检 测3次，均为阳性时，需进一步做定量检测。收起
