怎样培养醋酸菌种子?
醋酸发酵主要是由醋酸菌引起的,它能氧化酒精为醋酸,把葡萄 糖氧化为葡萄糖酸,是醋酸发酵中最重要的菌。老法制醋的醋酸菌,完全是依靠空气中、填充料及麸曲自然附着的醋酸菌,因此发展缓 慢,生产周期较长,一般出醋率较低,产品质量不够稳定。 目前,我 国还有相当一部分制醋工厂酿醋时不加纯种培养的醋酸菌。上海首先推广使用了人工培养的优良醋酸菌,并控制其发育与发酵条件,使食 醋生产达到优质高产。醋酸菌种子即醋母的培养可分为固态法和液态法两种。 1。 醋酸菌固态培养固态培养的醋酸菌是先经三角瓶纯种扩大培养,再在醋醅上进行固 态培养,利用自然通风回流法促使其大量繁殖。固态培养的醋酸菌纯度虽然不高,但已达...全部
醋酸发酵主要是由醋酸菌引起的,它能氧化酒精为醋酸,把葡萄 糖氧化为葡萄糖酸,是醋酸发酵中最重要的菌。老法制醋的醋酸菌,完全是依靠空气中、填充料及麸曲自然附着的醋酸菌,因此发展缓 慢,生产周期较长,一般出醋率较低,产品质量不够稳定。
目前,我 国还有相当一部分制醋工厂酿醋时不加纯种培养的醋酸菌。上海首先推广使用了人工培养的优良醋酸菌,并控制其发育与发酵条件,使食 醋生产达到优质高产。醋酸菌种子即醋母的培养可分为固态法和液态法两种。
1。 醋酸菌固态培养固态培养的醋酸菌是先经三角瓶纯种扩大培养,再在醋醅上进行固 态培养,利用自然通风回流法促使其大量繁殖。固态培养的醋酸菌纯度虽然不高,但已达到(除液体深层发酵制醋以外)各种食醋酿造的要求。
(1) 纯种三角瓶扩大培养。① 培养基制备:酵母膏1%(质量分数),葡萄糖0。3% (质量分 数),加水溶解,分装于1L三角瓶中。每瓶装人100mL,加上棉塞, 于aiMPa蒸汽中灭菌30min,取出冷却,在无菌室内加酒精(体积分数 95%) 4%。
② 接种量:接人新培养48h的醋酸原菌,每支试管原菌接2〜3瓶,摇匀。③ 培养:静置培养,30°C,5〜7d,表面上长有薄膜。有醋酸的 清香气味,即表示醋酸菌生长成熟。如果利用摇床振荡培养,三角瓶 装人量可增至120〜150mL,30°C培养24h,镜检菌体生长正常无杂菌,醋酸含量为15〜20g/L即可使用。
(2) 醋酸菌大缸固态育种。生产上的新鲜酒醅,置于有假底下面开洞加塞的大缸中,再将培养成熟的三角瓶醋酸菌种拌人酒醅面上, 拌匀。接种量为原料的2%〜3% (质量分数),加缸盖使醋酸菌生长 繁殖。
待1〜2d后品温升高,采用流法降温,即将缸下塞子拔出,放出醋汁流在醋面上,控制品温在38°C以下,培养至醋汁醋酸含量达 40g/L以上,则说明醋酸菌已大量繁殖,镜检无杂菌,无其他异味, 即可将种醅接种于大生产的酒醅中。
2。 液态醋酸菌种子罐培养(1) 一级种子(三角瓶振荡培养)。① 采用中科AS 1。41醋酸菌:在500mL三角瓶中装人lOOmL米 曲汁[6°B6,酒精(体积分数95%) 3%〜3。 5%],4层纱布扎口, 用O。
IMPa蒸汽灭菌30min,冷却,无菌操作加人酒精。接种后,对三角瓶进行振荡培养,培养温度31°C,培养时间22〜24h,摇床采用 旋转式(230r/min),偏心距为2。 4cm。② 采用沪酿1。
01醋酸菌:葡萄糖l0g,酵母膏l0g,水lOOmL;0。 IMPa,30min灭菌,每瓶(lOOmL)加人3mL酒精(体积分数 95%)振荡培养。培养温度30°C,培养时间24h,(2) 二级种子(种子罐通气培养)。
取酒精体积分数4%〜5%的酒精醪,抽到种子罐内,定容至70%〜75%;用夹层蒸汽加热至 80°C,再用直接蒸汽加热灭菌(0。 IMPa,30min),冷却降温至 32°C,按接种量的10%接入醋酸菌种;于30°C通气培养,培养温度31°C,培养时间22〜24h,风量1 : 0。
1。质量指标:总酸(以醋酸计)15〜18g/L,革兰氏染色阴性,无 杂菌,形态正常。3。 醋酸菌种子的培养及保藏以下是试管培养基的两种配方,可任选一种应用。① 酒液(酒精体积分数6%)lOOmL、葡萄糖0。
3g、酵母膏lg、 琼脂2。 5g、碳酸钙lg。② 酒精(试剂纯)2mL、葡萄糖0。3g、酵母膏lg、琼脂2。5g、碳酸钙1。 5g、水lOOmL。配制时,先将各组分先加热溶解,最后加入酒精;接种后,置于 30〜32°C的保温箱内培养48h。
醋酸菌因为没有孢子,所以容易被自己所产生的酸杀灭,而醋酸 菌中能产生酯香的菌株,每过十几天即自行死亡,因此应保持在0〜4°C冰箱内,使其处于休眠状态。由于培养基中加人了碳酸钙,可以 中和所产生的酸,故保藏时间可长些。
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