如何生产原种?
原种是由母种繁殖而来,常称为原种。主要用于繁殖栽培 种,以满足大量繁殖栽培种需要。1。培养塞配制(1)发酵粪草培养基①配方发酵稻草72%、发酵牛粪粉20%、麸皮5%、石膏 粉1%、磷酸钙1%、石灰1%。 ②制作把发酵稻草切成2〜3厘米长,加人粉碎牛粪粉、 麸皮、石膏粉、碳酸钙、石灰充分拌匀,加水调湿使培养基均匀 吸水至含水量达65%左右,随后堆成一堆,让培养基水分平衡2 〜3小时,即可装瓶。(2)发酵牛粪粉培养基①配方发酵牛粪粉98%、碳酸钙2%。 ②制作发酵后晒干的牛粪经过粉碎过筛(筛孔0。5厘米X0。5厘米),拌人碳酸钙,用1%石灰水调整含水量达65%左右, pH值约为8。5,堆成...全部
原种是由母种繁殖而来,常称为原种。主要用于繁殖栽培 种,以满足大量繁殖栽培种需要。1。培养塞配制(1)发酵粪草培养基①配方发酵稻草72%、发酵牛粪粉20%、麸皮5%、石膏 粉1%、磷酸钙1%、石灰1%。
②制作把发酵稻草切成2〜3厘米长,加人粉碎牛粪粉、 麸皮、石膏粉、碳酸钙、石灰充分拌匀,加水调湿使培养基均匀 吸水至含水量达65%左右,随后堆成一堆,让培养基水分平衡2 〜3小时,即可装瓶。(2)发酵牛粪粉培养基①配方发酵牛粪粉98%、碳酸钙2%。
②制作发酵后晒干的牛粪经过粉碎过筛(筛孔0。5厘米X0。5厘米),拌人碳酸钙,用1%石灰水调整含水量达65%左右, pH值约为8。5,堆成一堆使牛粪粉水分平衡,装瓶前再搅拌 一次。(3)发酵棉子壳培养基①配方棉子壳77%、牛粪粉20%、过磷酸钙1%、石灰 1%、碳酸钙②制作将棉子壳、牛粪粉、石膏和碳酸钙混匀后加水调 湿,含水量达70%,进行建堆发酵,堆宽1。
5米,高1。2〜1。5 米,长度根据数量而定,当料温达65°C〜70°C时可进行翻堆,一 般3〜4天翻堆1次,每次翻堆时应补充1%石灰水,含水量控制在65%〜70%之间,经过4〜5次翻堆,棉子壳长满大量髙温放 线菌而腐熟,适合双孢菇菌丝生长,腐熟棉子壳晒干备用。
制种 时把腐熟棉子壳按配方要求与其他辅料充分拌匀,用1%石灰水 调节,使含水量达65%左右,堆成一堆使水分充分平衡均匀,装 瓶前再搅拌均匀即可。(4)羊粪粉培养基①配方干羊粪98%、碳酸钙2%。
②制作方法同发酵牛粪粉培养基。以上四种培养基装瓶时,料要装得松紧适中,上紧下松,料 装至瓶肩时,用锥形棒在料中央打一个接近瓶底的孔洞,随后用 清水洗净瓶口内外壁,待瓶口干后塞上棉塞,并包扎牛皮纸,即 可进行灭菌。
(5)谷粒培养基①配方小麦(黑麦、高粱或小米等)97%、石膏2%、碳 酸钙H②制作(泡麦)在制种前1天下午,将小麦浸泡在2%石 灰水中,pH值11以上,一般夏天泡10〜12小时,春秋泡16〜 18小时,第二天早上检查麦粒是否已经浸透心,如果没有浸透心 应再延长浸泡时间。
(洗麦)然后把浸透的麦粒捞起沥去石灰水, 用清水冲洗干净,pH值达8即可。然后拌麦,拌麦可分为两种, 一种是捞起洗净麦料放人沸水中煮至麦粒无白心而外皮不裂为 止,然后捞起沥水,摊开晾干,再加人2%石膏粉,1%碳酸钙, 拌匀后装瓶;另一种是捞起洗净的麦粒,直接摊开适当晒干,厚 约7〜10厘米,待麦粒底层不积水,麦粒表面不粘水时,收成一 堆,加人3%〜牛粪,2%石膏粉,1%碳酸钙,拌匀后即可 装瓶。
装瓶是把已¥匀的麦粒装人菌种瓶,适当抖动瓶子,将麦 粒装到菌种瓶肩即可,随后在麦粒上面加盖预先准备的已发酵好 的粪草培养基或牛粪粉培养基,这样可以防止麦粒散动,另一方 面也有利于接种物的快速萌发定植,防止杂菌与麦粒接触,减少污染率。
、2。灭菌原种灭菌可采用高压蒸气灭菌器进持高压灭菌,压 力达0。 11〜0。14兆帕(1。 05〜1。 5千克/平方厘米),温度为121°C 〜126°C,灭菌时间为2〜2。 5小时,如没有高压蒸气灭菌器,也 可进行常压灭菌8〜10小时,然后焖一夜。
3。接种将已经灭菌的菌种瓶,放在接种室内冷却,当温度 下降至30°C以下时,将菌种瓶搬入无菌箱或无菌室内,先用2% 〜3 %煤酚皂液喷雾消毒,然后点燃气雾消毒剂对空间进行熏蒸 消毒,消毒30分钟后即可开始接种。
接种前应严格按照试管母 种质量要求挑选试管母种。随后,试管表面用75%酒精进行消 毒,从接种孔放人接种箱备用。如双人接种原种,一人负责拿原 种,并按无菌操祚要求拔开原种瓶棉塞,另一人在另一酒精灯旁 按接母种方法,无菌取下棉塞,并用火焰灼烧灭菌的接种铲或接 种针在母种试管斜面上切取约1。
5平方厘米双孢菇菌丝与培养基 块,迅速无菌移人原种瓶中,然后持原种瓶的人,把棉塞经火焰 灼烧消毒后,无菌操作塞上棉塞。如单人接种原种时,可将原种 瓶放置在接种架上,使酒精灯与原种瓶口相距1。
5厘米。随后按 上面操作接人母种即可,一般一支斜面试管母种可接6〜8瓶 原种。4。培养培养室要注意恒温,一般控制在23°C为好。培养 室每天通风15分钟,空气相对湿度控制在60%〜70%。收起