化学提取绿叶中的叶绿素有哪些方法
提取方法一般使用有机溶剂萃取法,但溶剂的选择有多种。
方法1:把新鲜的叶子剪碎,放在烧瓶中,加水使之淹没。用酒精灯加热煮沸,倒去水后,加入70~75%酒精(所加的量,仍以淹没为宜)。在瓶口插上一个玻璃漏斗,把烧瓶放在水浴锅中加热煮沸。 若没有水浴锅,可用大烧杯代替。由于叶子内的色素溶解在酒精中,所以烧瓶内的溶液逐渐变为深绿色。然后过滤(过滤时,滤纸要用70~75%的酒精润湿,并且要紧贴在漏斗壁上)。
取3毫升滤液放入一支干净试管,再加入5毫升汽油和几滴水,用大拇指按紧管口,上下摇动几分钟,在试管架上 放置片刻后,则溶液分成上下两层,上层是轻的汽油层,主要含有叶绿素及胡萝卜素,故显绿色。 ...全部
提取方法一般使用有机溶剂萃取法,但溶剂的选择有多种。
方法1:把新鲜的叶子剪碎,放在烧瓶中,加水使之淹没。用酒精灯加热煮沸,倒去水后,加入70~75%酒精(所加的量,仍以淹没为宜)。在瓶口插上一个玻璃漏斗,把烧瓶放在水浴锅中加热煮沸。
若没有水浴锅,可用大烧杯代替。由于叶子内的色素溶解在酒精中,所以烧瓶内的溶液逐渐变为深绿色。然后过滤(过滤时,滤纸要用70~75%的酒精润湿,并且要紧贴在漏斗壁上)。
取3毫升滤液放入一支干净试管,再加入5毫升汽油和几滴水,用大拇指按紧管口,上下摇动几分钟,在试管架上 放置片刻后,则溶液分成上下两层,上层是轻的汽油层,主要含有叶绿素及胡萝卜素,故显绿色。
下层是酒精层,主要含有叶黄素,故显黄色。
方法2。对非植物体的材料(如蚕粪)可用萃取法,萃取溶剂通常用高浓度丙酮为最佳,因为叶绿素极易溶于丙酮,且丙酮的沸点低(56。2℃),易浓缩也易回收。
加热浓缩时叶绿素热分解物少,产品色调好,达到终点温度低,时间短。
方法3。在实验室中提取叶绿素最简便的方法就是用丙酮(浓度96%)乙醇(浓度98%)1:1混合液,将叶片浸在溶液中,放在暗处2小时,便可提取的十分干净。
方法4。新鲜品研磨法提取:
▲ 将新鲜菠菜(Spinacia)叶片洗净擦干,去叶柄及叶脉。称取样品 8g,剪碎置研 钵内(加入少量碳酸钙),加入8cm3丙酮及少许固体碳酸钠,迅速研磨成匀浆;然后再加入20cm3丙酮充分研磨。
▲ 在一玻璃漏斗底部垫一小团脱脂棉,将匀浆通过脱脂棉过滤至已装有20cm3石油醚的分液漏斗中,再用少量的丙酮冲洗叶片残渣及研钵,合并滤液。
▲ 沿分液漏斗的壁小心加入40cm3蒸镏水,轻轻摇动,使色素转移到上面的石油醚层静置数分钟,待分层清楚后弃去下面的丙酮一一水层。
如发生乳化现象可加入2-3cm3饱和NaCl溶液。
▲ 在分液漏中再加入40cm3蒸镏水,轻轻摇动,以洗去石油醚中残留的丙酮,共洗两次。然后将叶绿素的石油醚提取液放入具塞锥形瓶中,置暗处或用黑纸包好备用。
有机溶剂溶解一般用于提取,提取液中除了叶绿素外还含多种色素及脂溶性杂质。装柱法用于分离提取液中各成分,得到纯净的叶绿素。薄层色谱法也可分离,但分离量很小,一般用于鉴别而不用于制备。收起