怎样制作水牛冷冻精液?
冷冻精液是指在超低温,即一79°C或一196°C条件下保存的精液,保存期长,是保存精液的先进技术,为人工授精的发展应用开拓了更为广阔的前景,用保存16年的冷冻精液授精仍可受胎产犊。由于冷冻精液保存期长,可以做到常年平衡采精制成冻精。 1头公牛可年生产颗粒冻精2万粒以上,可配3000〜5000头母牛,高者可达1万头,最高纪录达到23。8万头次,大大提高了优秀种公牛的利用率,有利于牛的改良;可减少种公牛的饲养量,节约饲料费用和伺料消耗;有利于远距离运送精液和进行种公牛的评定。 因此,牛的冷冻精液已广泛用于生产。为了保证冷冻精液质量,使其生产过程规范化,国家标准局颁布实行了《牛冷冻精液国家标...全部
冷冻精液是指在超低温,即一79°C或一196°C条件下保存的精液,保存期长,是保存精液的先进技术,为人工授精的发展应用开拓了更为广阔的前景,用保存16年的冷冻精液授精仍可受胎产犊。由于冷冻精液保存期长,可以做到常年平衡采精制成冻精。
1头公牛可年生产颗粒冻精2万粒以上,可配3000〜5000头母牛,高者可达1万头,最高纪录达到23。8万头次,大大提高了优秀种公牛的利用率,有利于牛的改良;可减少种公牛的饲养量,节约饲料费用和伺料消耗;有利于远距离运送精液和进行种公牛的评定。
因此,牛的冷冻精液已广泛用于生产。为了保证冷冻精液质量,使其生产过程规范化,国家标准局颁布实行了《牛冷冻精液国家标准》,对牛冷冻精液的质量和制作过程提出了指标和要求,其制作过程如下。(1)采精制作冷冻精液的种公牛应合乎本品种种用公牛特等或一等的标准,并经健康检査无传染性疾病。
采精按常规操作进行。精液经品质鉴定应是乳白色或稍带黄色,精子活率不低于0。6,密度每毫升不少于6亿个,畸形率不得高于15%,方可用于制作冷冻精液。(2)冻精稀释液配制冻精用的稀释保护剂,必须用新鲜的双重蒸馏水和卵黄,化学试剂应在二级以上,所用器具必须做到清洁无菌。
稀释保护剂现配现用,或配制后放入4°C〜5°C冰箱中备用,但不应超过1周。①细管冷冻精液稀释液配方柠檬酸钠一乳糖一卵黄稀释液:12%乳糖液36。0毫升,3%柠檬酸钠液38。0毫升,卵黄20毫升,甘油6毫升。
脱脂奶一卵黄稀释液:脱脂奶82毫升,卵黄10毫升,甘油8毫升。②颗粒冷冻精液稀释液配方蔗糖一卵黄稀释液:12%蔗糖液75毫升,卵黄20毫升,甘油5毫升。乳糖一卵黄稀释液=12%乳糖液75毫升,卵黄20毫升,甘油5毫升。
柠檬酸钠一卵黄稀释液:2。9%柠檬酸钠液73毫升,卵黄20毫升,甘油5毫升。上述各项稀释液,在每100毫升中,加青霉素、链霉素各5万〜10万单位。安瓿冷冻精液可使用吸管冷冻精液稀释液配方。(3)精液稀释与分装用准备好的稀释液,按1:10〜20的比例进行稀释,稀释后每毫升精子数不少于6000万个,直线前进运动精子数4000万个左右。
稀释精液的温度在1〜1。5小时降至4°C〜5°C,分装于细管或安瓿内,分装时要防止温度回升,可在冰柜中进行。分装时采用的细管先用细管印字机将生产冷冻精液的站名、生产日期、牛号等打印在细管上,经紫外线灭菌后使用。
分装时采用细管精液真空分装机进行,以聚烯醇粉末、精制固状石蜡或超声波塑料热合封口。将已分装封口的细管精液用4〜6层灭菌纱布或毛巾包裹后,置于4°C〜5°C的冰箱中平衡2〜4小时。(4)冷冻细管精液冷冻采用广口瓶或大口液氮罐盛装液氮,其上放一铜纱网或尼龙纱网作为冷冻筛网,筛网底部固定4厘米厚的空心塑料泡沫,使筛网漂浮在液氮面上,并距液氮表面2厘米。
将经过降温平衡的细管精液单层平放在冷冻筛网上放人液氮里,加盖熏蒸6〜8分钟,然后将细管精液和筛网一并浸入液氮内深冻。深冻结束后,抽样镜检,将合格细管冻精置于贮精罐内贮存。颗粒精液冷冻,采用广口瓶盛液氮,液氮量保留至瓶口10厘米处,另用一口径略小于保温瓶口的铝合金或不锈钢圆形饭盒放在广口瓶内距液氮面1。
5厘米处,盒盖反转来置于盒上冷却至一251^35°C时,将经降温平衡的稀释精液定量(每滴0。1毫升)地滴于盒盖上,每盒滴冻完毕,加盖熏蒸1〜2分钟后,随即放入液氮内浸泡,深冻,每一头牛的精液滴冻完毕后,分别计数分装,移人贮精罐内贮存。
制作颗粒冻精使用的滴管应事先预冷,与精液平衡温度一致,滴管口的大小应事先测量好,每10滴为1毫升,每滴完1头公牛的精液,必须更换滴管、铝盒等用具,操作要准确、迅速,颗粒大小均匀。细管冻精的贮存用橡皮筋扎成50〜70支的小捆,颗粒冻精用灭菌小玻璃瓶或无菌塑料瓶分装,每小瓶以50或100粒为宜。
瓶外详细标记公牛号、生产日期等。最后贮存于隔热性能良好的液氮贮精罐提漏内。贮精罐内的液氮要经常保持在冻精以上的位置,不可使冻精露出液氮表面。取用冻精时,必须在贮精罐颈口操作,动作要快,取完后,及时盖好罐塞、罐盖,防止温度回升造成对精子的不利影响。
冻精贮存罐每年至少要彻底清洗1次。收起