如何用薄层色谱鉴别黄酮
摘 要 目的 探讨鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分的方法。方法 应用薄层色谱法鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分,黄酮采用ρ=3%AlCl3(乙醇)溶液显色,生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。结果与结论 以薄层色谱鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分,不同于一般化学鉴别(试管法),其分离效果较好,专属性强,具有实际参考价值。 关键词 广金钱草;薄层色谱鉴别;黄酮;生物碱 广金钱草是豆科植物广金钱草Desmodium styracifolium (Osb。)Merr。 的干燥地上部分,为较常用中药[1,2]。 中国药典2000年版收载有“清热除湿,利尿通淋”的作用[1]。对广金钱草的鉴别,文献主...全部
摘 要 目的 探讨鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分的方法。方法 应用薄层色谱法鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分,黄酮采用ρ=3%AlCl3(乙醇)溶液显色,生物碱采用稀碘化铋钾试液显色。结果与结论 以薄层色谱鉴别广金钱草黄酮和生物碱成分,不同于一般化学鉴别(试管法),其分离效果较好,专属性强,具有实际参考价值。
关键词 广金钱草;薄层色谱鉴别;黄酮;生物碱 广金钱草是豆科植物广金钱草Desmodium styracifolium (Osb。)Merr。 的干燥地上部分,为较常用中药[1,2]。
中国药典2000年版收载有“清热除湿,利尿通淋”的作用[1]。对广金钱草的鉴别,文献主要介绍性状鉴别、显微鉴别及一般的化学鉴别(试管法) [1,3]。本文以薄层色谱法鉴别广金钱草中的黄酮和生物碱成分,报道如下。
1 仪器及试剂 1。1 仪器 20 cm×10 cm双槽展开缸。 1。2 试剂 薄层层析硅胶G(化学纯),GF254(化学纯),青岛海洋化工厂产品。 层析氧化铝(碱性),100~200目,上海社园精细有限公司产品。
羧甲基纤维素钠,上海化学试剂分装,黏度2%水溶液为300~800 mPa/s。其余试剂均为分析纯。 2 供试品及对照药材 2。1 广金钱草药材购自采芝林药店北京路分店,经广东药学院药用植物与生药学教研室鉴定为豆科广金钱草Desmodium styracifolium (Osb。
)Merr。(中国药典2000年版一部)的全草。 2。2 广金钱草对照药材由广东省药品检验所中药室提供。 3 广金钱草黄酮薄层色谱鉴别[2] 取广金钱草粉末1 g,置圆底瓶中,加甲醇20 mL,加热回流1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加水10 mL使溶解,滤过,滤液用醋酸乙酯提取2次,每次10 mL,合并醋酸乙酯液,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。
另取广金钱草对照药材1 g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各10 μL,分别点于同一以ρ=0。3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以ψ(醋酸乙酯∶甲酸∶水)=(8∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以ρ=3%AlCl3(乙醇)溶液[4,5], 105 ℃加热约5 min,置紫外光灯(365 nm)下检视[6],供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
见图1。 4 广金钱草生物碱薄层色谱鉴别 取广金钱草粉末1 g,置圆底瓶中,加浓氨溶液5 mL[6],密塞,摇匀,放置30 min,加氯仿50 mL,加热回流2 h,取出放冷,分取氯仿液,药渣再用氯仿适量洗涤,合并氯仿液,用无水硫酸钠脱水,置水浴上蒸至约1 mL,加于碱性氧化铝柱(5 g,直径15 mm)上,用ψ(氯仿∶无水乙醇)=(1∶1)混合溶液50 mL洗脱[6],收集洗脱液,置水浴上蒸至约1 mL,作为供试品溶液。
另取广金钱草对照药材1 g,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000版一部附录ⅥB)试验,吸取上述两种溶液各4 μL,分别点于同一以ρ=3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板上,以ψ(苯∶丙酮∶甲醇)=(8∶3∶0。
5)为展开剂,另槽用等量的浓氨溶液预平衡15 min,展开,取出,晾干。置254 nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的暗斑点;喷以稀碘化铋钾试液[6,8],供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
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