特异性抗原的检测方法有哪些?
(一)间接免疫荧光法 本法是将分离获得的外周血单个核细胞分别与抗相应CD的单克隆抗体(如CD2、CD4、CD8)结合后,洗去游离的抗体,继加荧光素标记的抗小鼠IgG抗血清,经温育结合后,洗去多余的标记抗体,取样制片,用荧光显微镜观察并计数约200个单个核细胞,以荧光阳性细胞与计数细胞总数之比,求得相应CD抗原阳性的T百分率。
(二)免疫细胞化学法 通常用酶免疫检测法,如APAAP酶免疫桥联法。为减少非特异性着染,可选用生物素-链霉亲和素系统试剂作ABC法染色。该类方法可用普通显微镜观察,凡呈棕黄色的细胞为相应CD抗原阳性细胞,计其占总淋巴细胞的百分率。
(三)抗体致敏细胞花环法...全部
(一)间接免疫荧光法 本法是将分离获得的外周血单个核细胞分别与抗相应CD的单克隆抗体(如CD2、CD4、CD8)结合后,洗去游离的抗体,继加荧光素标记的抗小鼠IgG抗血清,经温育结合后,洗去多余的标记抗体,取样制片,用荧光显微镜观察并计数约200个单个核细胞,以荧光阳性细胞与计数细胞总数之比,求得相应CD抗原阳性的T百分率。
(二)免疫细胞化学法 通常用酶免疫检测法,如APAAP酶免疫桥联法。为减少非特异性着染,可选用生物素-链霉亲和素系统试剂作ABC法染色。该类方法可用普通显微镜观察,凡呈棕黄色的细胞为相应CD抗原阳性细胞,计其占总淋巴细胞的百分率。
(三)抗体致敏细胞花环法 用相应的CD单克隆抗体致敏醛化的红细胞作为指示物,它与受检的细胞混匀后,置室温片刻,继经低速离心,移放室温作短期温育或4℃过夜后,重悬取样涂片染色镜检。收起