蝎毒怎么采集分离？
采集蝎毒素氨基酸受体及组成蝎子在受到激怒的情况下，出于防御或攻击的本能，会从毒囊中排出毒液。蝎毒的采集就是依据这个道理。采集蝎毒的常用方法有剪尾法、机械刺激法和电刺激法三种。剪尾法：夹住蝎的后腹部第五节的两侧，剪下蝎子的尾节，破碎后浸入生理盐水（0。 9%的氯化钠溶液）中，浸出有毒部分，再将尾节研磨，用离心机离心（5000转/分）5分钟，重复3次。集中有毒的液体，放入容器内，再制成干毒粉，置于-5℃下保存备用。这种方法，每条蝎子只能采毒一次，而采毒后的蝎子降低了药用功能和经济价值，对蝎子的伤害也大，通常不采用。 人工刺激法：用镊子夹住蝎子的一个螯肢，提起悬于容器中片刻，多数蝎子的尾刺即...全部
采集蝎毒素氨基酸受体及组成蝎子在受到激怒的情况下，出于防御或攻击的本能，会从毒囊中排出毒液。蝎毒的采集就是依据这个道理。采集蝎毒的常用方法有剪尾法、机械刺激法和电刺激法三种。剪尾法：夹住蝎的后腹部第五节的两侧，剪下蝎子的尾节，破碎后浸入生理盐水（0。
9%的氯化钠溶液）中，浸出有毒部分，再将尾节研磨，用离心机离心（5000转/分）5分钟，重复3次。集中有毒的液体，放入容器内，再制成干毒粉，置于-5℃下保存备用。这种方法，每条蝎子只能采毒一次，而采毒后的蝎子降低了药用功能和经济价值，对蝎子的伤害也大，通常不采用。
人工刺激法：用镊子夹住蝎子的一个螯肢，提起悬于容器中片刻，多数蝎子的尾刺即会排出毒液，但也有少数蝎子不排毒液的，不排毒液的可用比如细木筷子等硬物轻碰蝎子的头胸部或前腹部，刺激蝎子的尾刺排毒。电激法：该法是用电子脉冲提毒仪器采集蝎毒的方法。
此法采毒量大，工效高，一人操作，全年多次采毒而不致于损害蝎子，是使用较多也较科学的采毒方法。三种采毒方法相比，剪尾提毒法简便、快速、收毒率高，适于大批量采集蝎毒；缺点是活蝎只能供一次采毒，人工刺激法获取的毒液清澈透明，但采毒量较少，工效低，速度慢，对大规模提取蝎毒不适用。
毒素类型及氨基酸序列图册。部分蝎毒素氨基酸序列及组成电激法获取的毒量较人工刺激法取得的毒量要多1倍。大约3000只成蝎可产湿毒6-7g，可冻成干毒1g，即每毫克湿毒可加工成0。14-0。16mg干毒。
每只东亚钳蝎1次可产0。34mg左右的干毒。雄蝎的个体比雌蝎小，其产毒量也比雌蝎少。在电脉冲刺激下，1只雌蝎3次可产湿毒2。59mg，1只雄蝎3次产2。01mg湿毒（按隔7天后采1次毒计算）。
但需严格注意卫生，确保采毒的纯度；个别蝎子在通一次电时不排毒，须再通一次电，但通电时间不得超过2秒钟，频率128赫兹，电压6-10伏。以免烧坏仪器和损伤蝎子。蝎子的排毒量随温度的变化高低而各有差异。
温度低时排毒量相对较少，当温度低于20℃时，蝎子的排毒量相当少，当低于10℃时，蝎子则停止排毒。因此，常温养殖蝎子要采毒应尽量在6月份气温高于25℃以上时进行。孕蝎和种蝎不能用于采毒。怀孕早期的孕蝎可以采毒，但在临产前不能采毒。
用于采毒的蝎子多为商品成蝎和老龄蝎。干燥蝎毒采集工艺蝎毒液成分主要为蛋白质和酶类，容易失去活性。常温下极易变质，必须加工成干毒粉才能保存较长时间。蝎毒液除了马上用于分离纯化者外，应尽快进行干燥。
蝎毒干燥的目的，就是尽量除去毒液中的水分，提高粗毒的稳定性，使之便于保存、分析、出售。常用的干燥方法有两种：一，若要保持蝎毒中酶的活力，应选用真空冷冻干燥；二，若仅为了保持毒性，采用真空干燥即可。
（1）真空干燥（即真空减压干燥）是在低压下，使蝎毒液中的水分快速蒸发的方法。真空干燥装置包括真空干器、冷凝管和真空泵。干燥器顶部活塞接通冷凝管，冷凝管的另一端依次连接吸滤瓶、干燥塔和真空泵。蒸汽在冷凝管中凝集后滴入吸收瓶中。
干燥器中放有干燥剂（如五氧化二磷等）和蝎毒液样品。使用前，先在干燥器活塞四周涂上少许凡士林，然后检查整个装置是否漏气。使用时，先将蝎毒液和干燥剂分别装入平皿中，然后置于干燥器中，启动真空泵抽气至盖子推不动，依次关闭活塞和真空泵。
蝎毒干燥后，应缓缓旋开活塞，以防止空气冲散蝎毒干粉。最后在净化条件下取出干粉，立即分装，密封保存。（2）真空冷冻干燥先将蝎毒液在低温冰柜中预冻成固体（用不锈钢皿盛装毒液），然后在低温和高真空度上使之升华，即可得到纯白色蝎毒干粉。
由于冷冻干燥是在低温和高真空度下进行的，所以毒液在冻干过程中不起泡、不沾壁、疏松、易取出、易溶于水，有利于保存。纯化东亚钳蝎粗毒层析分离曲线蝎毒的分离纯化过程一般是先经过按照分子量大小分离的色谱柱，再经过离子交换柱，最后采用反向HPLC技术，获得单一的组分。
程序为：先用CM-SephadexC-50离子交换层析分离，再用SephadexG-50过滤，也可采用CM-SephadexC-50、Sp-SephadexC-25离子交换柱层析和SephadexG-50凝胶过滤三步分离程序。
如采用CM-SephadexC-50进行离子交换层析，将毒性较强的组分透析后再用重层析，再用SephadexG-50凝胶过滤，纯化可得毒素。或采用RP-HPLC对东亚钳蝎的粗毒进行分离，并且用两种不同的HPLC系统反复分离，用0。
1%三氯醋酸-水和0。1%三氯醋酸-70%乙醇-水进行梯度洗脱。或进行二级提取，即用CM-SephadexC-50离子交换层析提取，再用凝胶过滤，经CM-SephadexC-10除盐。如采用SepharoseFF阳性离子交换凝胶柱，可望获得较高纯度的单一有效成分。
而利用HPCE及HPLC可较好显示蝎毒中小分子多肽的组成及相对含量，其结果基本一致。当下对蝎毒分离纯化的研究就主要集中在通过选择不同柱长、流速和梯度的凝胶层析和高效液相色谱来获得具有高抗癌活性的单一成分的抗癌多肽，比如用三步色谱法在蝎毒中分离得到了抗癫痫肽并测定了其N端50个氨基酸序列，用离子交换色谱和凝胶排阻色谱从粗毒中分离出镇痛肽，用一步CMSephadexC-50超长柱从粗毒中纯化了镇痛肽，用低压阳离子交换柱和低压排阻柱及离子交换柱从东亚钳蝎中分离和提取了抗肿瘤肽。
比如东亚钳蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽（analgesicantitumoralpeptide，AGAP），从东亚钳蝎蝎毒中分离纯化得到的单组分活性肽，为单一肽链的单纯碱性多肽,等电点大于10。含有碱性氨基酸，还富含疏水性氨基酸。
活性肽的N末端部分氨基酸序列为：VRDGYIADDKNCAYFCGRNAYCDDE。为获得高纯度的蛋白质，往往需要反复使用凝胶过滤层析和离子交换层析，但这种分离方法的不足之处在于样品损失率太高，且劳动量较大。
利用基因工程技术制备蝎毒特异蛋白质的研究正在研制之中，但成本较高，数量有限。因此，蝎毒粗毒的分离仍是获得蝎毒特异性的蛋白质的主要来源。保存和运输蝎毒液在普通冰箱（1-4℃）中，只能作短期保存。
只有冻干成结晶粉状，才能保存其生理活性。影响蝎毒干粉稳定性的主要因素是水分、空气和温度。当干粉含水量低于10%时，能抑制微生物活性；含水量低于3%时，可抑制化学活性。所以，应将蝎毒干粉分装在小瓶或小管中，并用熔封或石蜡封口，以隔绝空气，然后置于低温冰箱（一30℃）中保存。
从养殖场运送新鲜蝎毒液到收购、加工部门或检验部门，必须用广口瓶保温冰瓶（瓶中加碎冰块降温）携带。若运送蝎毒干粉至远处，也应采取降温措施，以防蝎毒蛋白质变性失活。中药法采集蝎毒提取中药流程多数动物类中药的有效成分尚不明确或不完全明确，其提取纯化工艺研究较少，在中成药生产工艺中动物类中药基本是生药粉末直接配料，少数用水、醇提取，水醇法精制。
由于动物类中药的有效成分多数是蛋白质类、多糖类等大分子物质或其水解产物，常规方法很难充分地提出、分离和纯化这些大分子物质。传统上蝎毒以全蝎原粉入药效果更好，也是当下临床常采用的方法。但原粉剂量大、卫生学难合格，同时全蝎多是以产地加工后的产品入药。
而全蝎的产地加工一般以清水煮或盐水煮居多，但这两种方法又存在很多不合理的地方，比如有效成分的损失、变性，质量难以控制，盐水煮又因为加盐量不同，使得临床剂量不准确等而使得进一步使用受到限制。PCR策略采用PCR可以根据蝎毒素蛋白N端和C端序列设计和合成正向和反向引物，以从毒腺组织mRNA反转录的cDNA为模板，PCR扩增出相应于该蛋白的cDNA，可以克隆出B。
martensiiKarsch（BmK）抑制型昆虫毒素（BmKIT3和BmKIT4）的cDNA，但该法应用于克隆蝎毒素cDNA时存在一个明显的不足，就是无法获取翻译后加工掉的氨基酸序列（信号肽和额外氨基酸序列）。
因此，有人对常规PCR作了改进，他们采用反向PCR策略成功地分离了一种L。
quinquestriatushebraeus（Lqh）A-神经毒素的全长cDNA，其策略是在cDNAs两端加上衔接头，环化后用作模板进行PCR，线性PCR产物经补平和5c磷酸化后用T4DNA连接酶环化，再用限制酶消化产生粘性末端，克隆到载体上。收起
