分光光度计测量误差来源有哪些？
大部分常规理化项目的快速检测都是使用分光光度法，需 要用到分光光度计。该仪器的误差来源主要有以下方面：(1)仪器本身性能带来的误差①复色光对比耳定律的偏离。比耳定律成立的前提条件是 入射光是单色光，但是精度再髙的仪器，即使是双单色器的分 光光度计，也只能获得近乎单色的光，无法获得纯单色光，它 仍然含有狭窄光通带，具有复色光的性质。 而复色光会导致比 耳定律的正偏离或负偏离。光谱带宽应该是越小越好，但是随 着光谱分辨率的提髙，仪器的灵敏度降低，所以选择仪器时要 综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时， 可近丨以认为符合比耳定律。 ②杂散光的影响。杂散光是指进入检测器的处于待...全部
大部分常规理化项目的快速检测都是使用分光光度法，需 要用到分光光度计。该仪器的误差来源主要有以下方面：(1)仪器本身性能带来的误差①复色光对比耳定律的偏离。比耳定律成立的前提条件是 入射光是单色光，但是精度再髙的仪器，即使是双单色器的分 光光度计，也只能获得近乎单色的光，无法获得纯单色光，它 仍然含有狭窄光通带，具有复色光的性质。
而复色光会导致比 耳定律的正偏离或负偏离。光谱带宽应该是越小越好，但是随 着光谱分辨率的提髙，仪器的灵敏度降低，所以选择仪器时要 综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时， 可近丨以认为符合比耳定律。
②杂散光的影响。杂散光是指进入检测器的处于待测波长 光谱带宽范围外的其他波长组分，它是光谱测量中误差的主要来 源。产生原因有：分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色 器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处，由于单色器 透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低，杂散光的影响更 为显著。
杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差。实 际工作中，在定量分析时，一般在吸收峰或其附近处测量样品吸 光度。如果在分析波长处含有杂散光，这时样品的透光率较小， 而杂散光大部分透过，使测量吸光度低于真实吸光度。
③仪器噪声对测T的影响。仪器噪声也是仪器的一个重要指标，它表征仪器做稀溶液的能力，是叠加在待测量的分析信 号中的不需要的信号。扫描100%T线和0T线，可观察到分光 光度计的绝对噪声水平，如果仪器噪声较大，会掩盖较小的测 量信号，一般用噪声的两倍来表示仪器的灵敏度。
④波长和吸光度准确度。样品的每一个值都是在一定的波 长下测得的，如果波长误差很大，测出的值肯定不准。吸光度准 确度也是用户对仪器的直接要求，更应引起足够的重视。国家计 量检定规程规定，双光束紫外可见分光光度计透射比准确度为A 级 ±0。
6%，B级 ±1。0%。(2)测量条件的选择①参比溶液和溶剂的选择。分光光度计的测量实际上是以 通过参比池的光强度作为入射光强度来测定试样的吸光度，先 调节仪器使透过参比池溶液的吸光度为零，然后让同一束光通 过样品，使得吸光度比较真实地反映待测物质的浓度，所以参 比溶液的选择非常重要。
如果仅有待测物质与显色剂的反应产 物有吸收，可用纯溶剂或蒸馏水作参比溶液。如果显色剂有颜 色，并在测定波长下有吸收，则用显色剂溶液作参比溶液，所 加入显色剂及其他试剂的量，与试样中的加入量应一致。
如果 样品中其他组分本身的颜色对测定有干扰，而所用显色剂没颜 色，则用不加显色剂的样品溶液作参比液。正确选择合适的溶剂，对提高分析的准确度起重要作用。为 减小溶剂中杂质的影响，应选择高纯度的溶剂；溶剂应不与待测 物质发生化学反应；待测物在溶剂中要有一定的溶解度；在测定 的波长范围内，溶剂本身没有吸收，注意常用溶剂的最短可用波长；当用挥发性大的溶剂时，测量过程中吸收池应加盖。
②测试波长的选择。当用分光光度计对溶液进行测定时， 首先需要选择合适的测量波长。选择的依据是该被测溶液的吸 收曲线。在一般情况下，我们总是选择最大吸收波长作为测量 波长，这样可以提髙灵敏度。而在有些情况下最大吸收峰很尖 锐、吸收过大或附近有干扰存在，就不能选最大吸收波长，而 必须在保证有一定灵敏度的情况下，选择吸收曲线中的其他波 长进行测定（曲线较平坦处对应的波长)，以消除干扰。
绘制吸 收曲线是正确选择波长的有效手段和方法。收起
