基因扩增实验仪器有哪些?
基因扩增实验仪器1。PCR热循环仪2。移液器(0。12。5μL)3。PCR板实验试剂1.10×缓冲液:500mmol/LKCI、100mmol/LTriS·HCI(pH8。3,室温)、15mmol/LMgCl22。 dNTPMix:2。5mmol/LdATP、2。5mmol/LdCTP、2。5mmol/LdGTP、2。5mmol/LdTTP3。Tag酶5U/μL:4。DNA模板1ng/μL:5。引物16。 引物27。 引物溶液浓度2uM基因扩增实验步骤1.在200ulEppendorf管内配制20ul反应体系2.按下述程序进行扩增94℃预变性3min;94℃变性30s;58℃退火30...全部
基因扩增实验仪器1。PCR热循环仪2。移液器(0。12。5μL)3。PCR板实验试剂1.10×缓冲液:500mmol/LKCI、100mmol/LTriS·HCI(pH8。3,室温)、15mmol/LMgCl22。
dNTPMix:2。5mmol/LdATP、2。5mmol/LdCTP、2。5mmol/LdGTP、2。5mmol/LdTTP3。Tag酶5U/μL:4。DNA模板1ng/μL:5。引物16。
引物27。
引物溶液浓度2uM基因扩增实验步骤1.在200ulEppendorf管内配制20ul反应体系2.按下述程序进行扩增94℃预变性3min;94℃变性30s;58℃退火30s;72℃延伸1min30s30cycle;72℃延伸4min;4℃pause基因扩增注意事项1.引物设计应具有特异性,依靠引物设计软件进行引物设计;引物分装成多管,不宜反复冻融多次;2.PCR反应的各种成份不能遗漏,操作应戴手套,冰上操作;3.根据引物的Tm值和扩增片段长度以及PCR仪的特性来设定PCR循环条件;4.注意分析电泳检测PCR产物时出现拖带或非特异性扩增带、无DNA带或DNA带很弱的可能原因。收起