请问如何进行精液品质检查?
精液品质检查的目的是了解公猪精子品质的优劣,可以作为 精液稀释、保存利用运输的依据,确定其配种负担能力,同时是 对公猪伺养水平的检验,也是对公猪生殖器官功能和采精操作技 术质量的判定。(1) 精液外观性状检查主要通过肉眼观察精液的色泽、浑 油度和计量精液量。 ① 采精量猪的精液应经过4~6层的消毒纱布或离心处理, 除去胶状物质后再计量。公猪的精液量平均为250毫升,范围在 150~500毫升。② 色泽正常猪精液为淡白或浅灰白色、精液乳白程度越 高,精子越多。 如色泽异常,说明生殖器官有疾病。精液为淡绿 色是混有脓液,淡红色精液是混有血液,精液呈淡黄色是混有尿 液。颜色异常的精液应废...全部
精液品质检查的目的是了解公猪精子品质的优劣,可以作为 精液稀释、保存利用运输的依据,确定其配种负担能力,同时是 对公猪伺养水平的检验,也是对公猪生殖器官功能和采精操作技 术质量的判定。(1) 精液外观性状检查主要通过肉眼观察精液的色泽、浑 油度和计量精液量。
① 采精量猪的精液应经过4~6层的消毒纱布或离心处理, 除去胶状物质后再计量。公猪的精液量平均为250毫升,范围在 150~500毫升。② 色泽正常猪精液为淡白或浅灰白色、精液乳白程度越 高,精子越多。
如色泽异常,说明生殖器官有疾病。精液为淡绿 色是混有脓液,淡红色精液是混有血液,精液呈淡黄色是混有尿 液。颜色异常的精液应废弃,立即停止采精,查明原因,及时治疗。③ 气味正常精液略带有腥味,气味异常的常伴有颜色的变 化。
有异味的精液不能用于输精,应废弃。④ 浑浊度(云雾状)由于精子运动翻腾滚滚如云雾状,精 液浑浊度越大,云雾状越显著,呈乳白色,精子密度和活率越 高。因此。根据精液浑浊度可估测精子密度和活率高低。
(2) 精子活力检查精子活力又称活率,是指精液中作直线 运动的精子占整个精子数的百分比。① 检查方法检查精子活力需借助显微镜,放大200~400 倍,把精液样品放在镜前观察。取1滴猪原精液或稀释后保存精 液于载被片上,盖上盖玻片、放在镜下观察。
或者在盖片上放1 滴精液,然后将盖片反过来盖于载玻片的凹窝中,即制成悬滴玻 片。放在37~38°C显微镜恒温台或保温箱内,400倍观察。低温 保存的精液须先升温,并经1。 5~2小时轻微振荡充氧才能恢复 活动并进行制片观察。
观察直线前进运动精子的百分率、精子运 动速度和形态。② 评定评定精子活力多采用0~1。0的10级评分标准,当 直线前进运动精子占视野精子的100%,精子活力为1。0;如有 80%精子作直线前进运动,精子活力为0。
8;如有50%的精子作 直线前进运动,精子活力为0。5,以此类推。为保证较高的受精 率,猪新鲜精液活力一般为0。7~0。8,液态保存精液一般在0。6 以上,冷冻保存精液在0。3以上,方可输精。
(3) 精子密度的检查精子密度是指单位体积(1毫升)的 精液中含有的精子数。该项指标为精液品质评定的重要指标,精 子密度大,稀释倍数高,可增加配种母猪数。测定精子密度的方 法有估测法、血球计数法和光电比色计测定法等。
① 估测法本法常与检查精子活力同时进行,根据显微镜下 精子的稠密和稀疏程度,划分力稠密、中等、稀薄三个等级。猪 精子密度一般较稀,平均每毫升为1亿~2亿个精子、所以每毫 升精液中精子数在3亿以上的为密,2亿左有为中等,1亿左右 为稀。
② 血细胞计数法采用白细胞计数法定期对公猪的精液进行 检查,可准确地测定单位体积精液中的精子数。操作方法:先用白细胞管吸取精液至0。5刻度处(稀释20 倍)或1。0刻度处(稀释10倍),再吸取3%NaCr溶液至吸管的11刻度处,用拇指和食指分别按住管的两头摇勻,弃去管尖端 的精液2~3滴,然后慢慢地沿计算板与盖片边缘间隙让其自流 少许,以溢满0。
1毫升的计算室为准,不能有气泡。先用低倍镜 找到400个小格组成的25个中方格的计数室,面积为1毫米2, 再用高倍镜找中方格,计算四角及中间共5个小方格中的精子 数。每个中方格由16个小方格组成。
压在中方格线上精子计上 不计下,计左不计右。每毫升精液中所含有精子数=5个中方格精子数X1000000① 光电比色计测定法首先将原精液稀释为不同比例,并用 血细胞计数法计算其精子密度,制成标准管,用光电比色计测定 其透光度,根据不向精子密度标准管的透光度,求出每相差1% 透光度的级差精子数,制成精子查数表。
测定精液试样时,将原 精液按一定比例稀释,根据其透光度查精子查数表,即得精液试 样的精子密度。(4) 精子形态精子形态与受精率密切相关,精液中含有大 量畸形精子和顶体异常精子,其受精力会大大降低。
为了保证受 胎率,必须检查精子的形态结构。精子畸形一般分为4类:一是头部畸形,如头部巨大、瘦 小、圆形、轮廓不明显、皱缩、缺损、双头等;二是颈部畸形, 如颈部膨大、纤细、曲折、不全、带有原生质滴、双颈等;三是 尾部畸形,如弯曲、曲折、回旋、短小、缺损、双尾等;四是顶 体异常,如顶体不完全、异形等。
正常精液中的畸形精子率不超 过 18%。检查方法:取少量精液迅速做成抹片,用红(蓝)墨水染色 3分钟,水洗干燥后,在600倍以上显微镜下观察。检查总精子 数不少于200个,并计算出畸形精子百分率。
(5) 其他检查① 精子存活时间和存活指数检查精子存活时间是指精子在 体外的总生存时间,检查时将精液置于0°C或37°C下,每隔2小时进行一次观察,并记录该时间的精子活率,直至无活动精子为 止,所需的总小时数为存活时间;存活指数是指相近两次检查的 平均活率与间隔时间的积相加总和,精子存活时间越长,指数越 大,说明精子生活力强,品质好。
① pH猪的新鲜精液pH为7。 4~7。 5, pH偏低的精液品 质较好,偏高则受精力、生活力和保存效果显著降低。用万能试 纸比色或用电动比色计测定。② 美蓝褪色试验美蓝是一种氧化还原指示剂,氧化时呈蓝 色,被还原时人色。
精子在美蓝溶液中,由于精子去氢酶在呼吸 时氧化脱氢,美蓝获氢离子后便使蓝色还原为无色。根据美蓝褪 色时间测知精液中存活精子数量的多少,判定精子的活率和密度 的高低。检查方法:用精液4份与0。
02%美蓝溶液1份混合,装入1 毫升试管内,以石蜡封口,放在25~40°C的温度下观察褪色 时间。③ 精液果糖分解测定精液果糖分解能力与精子活力密切相 关,因此本项测定可作为精子活力评定指标。
通常用1亿精子在 37°C厌氧条件下每小时消耗果糖的毫克数表示。检查方法:在厌氧情况下把一定量的精液(如0。5毫升)置 于37°C的恒温箱中3小时,每隔1小时取出0。 1毫升精液样本 进行果糖测定,将结果与放入恒温箱前比较,最后计算出果糖分 解系数。
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