基因芯片如何在结核病诊断中发挥作
基因芯片又称DNA或cDNA微阵列,是指在一个大约1 平方厘米的载体上,点布数以万计不同的寡核苷酸或cDNA 探针,与带标记的待测DNA或mRNA杂交,属于固相杂交,与膜杂交相似。通过激光共聚集荧光检测系统等对芯片进行扫描,根据产生信号强弱来判断与芯片探针相对应靶DNA 或mRNA中的变异或表达情况。 用计算机软件进行数据的比较和分析,从而对基因序列进行大规模、高通量的研究。1991年,美国Affymetrix公司的Fodor等首次提出DNA芯片的概念,是核酸杂交技术的一次革命性飞跃。1994 年,美俄科学家研制出一种生物芯片,检测P-珠蛋白生成障碍性贫血患者血样的基因突变,这是芯片技术...全部
基因芯片又称DNA或cDNA微阵列,是指在一个大约1 平方厘米的载体上,点布数以万计不同的寡核苷酸或cDNA 探针,与带标记的待测DNA或mRNA杂交,属于固相杂交,与膜杂交相似。通过激光共聚集荧光检测系统等对芯片进行扫描,根据产生信号强弱来判断与芯片探针相对应靶DNA 或mRNA中的变异或表达情况。
用计算机软件进行数据的比较和分析,从而对基因序列进行大规模、高通量的研究。1991年,美国Affymetrix公司的Fodor等首次提出DNA芯片的概念,是核酸杂交技术的一次革命性飞跃。1994 年,美俄科学家研制出一种生物芯片,检测P-珠蛋白生成障碍性贫血患者血样的基因突变,这是芯片技术第一次用于突变基因检测,为各学科耐药基因检测开辟了道路。
1996年,Af- fymetrix公司与惠普公司合作完成了一套较完整的芯片制作、杂交、扫描和数据处理系统。1997年以后用于临床诊断的DNA芯片相继问世并投人商业化生产。我国东南大学、中科院、清华大学、南开大学等制备了多种基因诊断芯片,为疾病的诊断及鉴别诊断、发病机制、耐药监测、新药研发等开辟了新途径。
2000年7月,“结核杆菌等致病菌耐药性变异检测DNA芯片的研制开发”与“致病菌抗药性诊断芯片的研制开发”等项目在上海全面启动,研制开发成果也有陆续报道,目前国内诊断芯片研制开发速度很快,应用前景相当广阔。
(1) 基因芯片技术用于分枝杆菌菌种鉴定。1999年,Troesch等基于16SrRNA和rpoB基因序列,利用基因芯片技术鉴定出70株27种不同菌种的分枝杆菌临床分离株,其中偶然分枝杆菌、猿分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、结核分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌复合群等19种菌种得以准确鉴定。
基因芯片技术可以快速准确鉴定大量的DNA序列,解决了传统菌种鉴定耗时、烦琐的问题,但两种鉴定结果有时存在一些分歧,需进一步研究。(2) 基因芯片技术用于结核分枝杆菌耐药性检测。耐多药肺结核已日渐成为医学上的一个难题。
为了克服和解决这一难题,其中一个要点就是要找到耐药菌的耐药基因,从而根据这些耐药基因设计化疗方案和研制新型抗结核药。收起