乙型肝炎E抗体的检查过程是什么?
1、取材:血液。2、乙型肝炎e抗体的测定原理采用单克隆抗-HBe包被反应板,加入待查标本,同时加入基因工程重组HBeAg和多克隆抗-HBe-HRP,形成竞争结合,如待测标本中抗-HBe含量高,则抗-Hbe-HRP与HbeAg结合后形成游离物被洗涤掉,加入TMB底物时显色淡,反之显色深。
3、试剂包被抗-HBs反应板及HRP-抗-HBs,阴、阳性对照血清,洗涤液、底物液等。4、操作方法(l)实验准备从冷藏环境中取出试剂盒,在室温下平衡30min,同时将浓缩洗涤液作1∶20稀释。
(2)加待测标本加入待测标本每孔0。05ml,并设阳性对照2孔,阴性对照2孔空白对照1孔。 (3)加中和试剂每孔0。05ml,空白对照孔不加。(4)加酶结合物每孔0。05ml,空白对照孔不加,充分混匀,置37℃孵育30min。
(5)洗板机洗板选择洗涤程序5次洗板,最后拍干。(6)加显色剂先加显色剂A,每孔0。05ml;再加显色剂B,每0。05ml;充分混匀,放置37℃避光孵育15min。 (7)终止反应每孔加终止液0。
05ml,混匀。(8)测定用酶标仪读数,可选择单波长450nm(以空白孔校零)或双波长450/630,读取各孔OD值。