如何进行肾穿组织光镜标本的制作？
肾穿组织光镜标本的制作包括固定、脱水、包埋、切片及染色等步骤。由于肾脏穿刺组织 的特殊性，以上各步骤的要求与常规病理标本的制作比较均更为严格。
(1) 固定:一般常用的肾组织固定液有两种，一是10%中性福尔马林缓冲剂（甲醛l〇ml 以pH 7。 2的PBS液稀释至100ml)，组织固定于此液中可放置较长时间而不会变硬。二是气 化汞-福尔马林液（即饱和气化汞4。 5ml、甲醛0。 5ml，使用前混合），组织在此液中固定5分钟 后再置于80%乙醇的饱和苦味酸液中作后固定，具有较好的助染作用。 此外，为了能够对临 床诊断剩余的标本进行一些原位杂交或其他研究，目前也有人主张使用4%多聚甲醛...全部
肾穿组织光镜标本的制作包括固定、脱水、包埋、切片及染色等步骤。由于肾脏穿刺组织 的特殊性，以上各步骤的要求与常规病理标本的制作比较均更为严格。
(1) 固定:一般常用的肾组织固定液有两种，一是10%中性福尔马林缓冲剂（甲醛l〇ml 以pH 7。
2的PBS液稀释至100ml)，组织固定于此液中可放置较长时间而不会变硬。二是气 化汞-福尔马林液（即饱和气化汞4。 5ml、甲醛0。 5ml，使用前混合），组织在此液中固定5分钟 后再置于80%乙醇的饱和苦味酸液中作后固定，具有较好的助染作用。
此外，为了能够对临 床诊断剩余的标本进行一些原位杂交或其他研究，目前也有人主张使用4%多聚甲醛磷酸缓 冲液对组织进行固定。无论使用哪种固定液，穿刺的肾组织标本都应该迅速放入固定液中，使 组织细胞的固有成分迅速凝固，维持良好的组织结构、形态。
(2) 脱水：由于固定后的标本含有大量水分，故浸蜡前必须进行脱水，以便使切片的支撑 物石蜡能够充分浸入组织中。常用的脱水剂是梯度乙醇，即先从低浓度开始，逐渐递增乙醇的 浓度(75%—85%—95%->无水乙醇），每一浓度浸泡20分钟，这样可避免组织的过度收缩和 硬化。
一般在脱水之后，常需要经过一个媒剂透明过程，目的是使石蜡充分浸入组织，达到包 埋支撑作用。透明媒剂常用二甲苯或三氯甲烷（氯仿），时间为2〇分钟。但要注意的是组织 在二甲苯中浸泡的时间不可过长，否则易发脆影响切片的质量。
(3) 浸蜡:将脱水、透明后的组织移入熔化的石蜡内浸渗。浸蜡一般选用熔点在58〜 621的石蜡为宜，时间在1~ 1。5小时。浸蜡时间过长、过短都会严重影响切片质量。浸蜡结 束后，即可进行组织包埋^
(4) 切片:将包埋好组织的蜡块修整后在切片机上切出厚2pm左右的切片（切片厚度不 能超过3pm，否则将影响诊断结果），在30 ~ 35T温水中展开后置于载玻片上，于701温箱烤 干待染色。
(5) 切片的染色:一般情况下，肾组织切片通常需进行4种染色，即苏木精伊红染色 (HE)、过碘酸希夫反应染色（PAS)、六胺银染色（PAM)及马松三色染色（Masson)，必要时可 加染其他染色，如刚果红染色等。
切片染色前须经过脱蜡处理步骤（二甲苯—无水乙醇— 95%乙醇—80%乙醇^水洗）。收起
