胞外体是胞外聚合物吗?
(1)胞外聚合物的提取 胞外聚合物(Extracelluler Polymer Substances, EPS)与细胞结合紧密,需要特定的方法才能将其从污泥中分离提出。在本实验中采用Frølund等人[ ]的方法来提取活性污泥表面的胞外聚合物。
首先,从反应器中取50mL活性污泥样品,在2000g、室温下离心15min后倒出上清液。离心后再向留在离心管内的生物体加入由526mg•L-1 NaCl,74。56mg•L-1KCl,760。 2mg•L-1Na3PO4和552mg•L-1NaH2PO4组成的磷酸盐缓冲溶液,使之再次呈悬浮液态。再将悬浮污泥样品移入烧杯中,在其中加入90g•...全部
(1)胞外聚合物的提取 胞外聚合物(Extracelluler Polymer Substances, EPS)与细胞结合紧密,需要特定的方法才能将其从污泥中分离提出。在本实验中采用Frølund等人[ ]的方法来提取活性污泥表面的胞外聚合物。
首先,从反应器中取50mL活性污泥样品,在2000g、室温下离心15min后倒出上清液。离心后再向留在离心管内的生物体加入由526mg•L-1 NaCl,74。56mg•L-1KCl,760。
2mg•L-1Na3PO4和552mg•L-1NaH2PO4组成的磷酸盐缓冲溶液,使之再次呈悬浮液态。再将悬浮污泥样品移入烧杯中,在其中加入90g•gMLVSS-1的离子交换树脂(732阳离子交换树脂)并以600rpm转速搅拌2h,使之混合。
混合后再于4000g离心300min以去除树脂和生物体,上清液则为EPS提取液[ ]。
(2)胞外聚合物的分析方法 EPS提取物中主要是多糖、蛋白质和DNA。多糖的测定采用蒽酮—H2SO4比色法[ ]。
即高温下糖类会被H2SO4脱水生成糠醛或糠醛衍生物,并与蒽酮(C14H10O)缩合成蓝色化合物,在620nm处测定吸光度(721型分光光度计),以葡萄糖的标准曲线可换算出多糖的含量[ , ]。
蛋白质采用紫外吸收法测定,同时测定260nm和280nm处的吸光度,利用下式计算蛋白质的浓度(mg•mL-1):ρ蛋白质=1。45×A280nm-0。74×A260nm,该方法可消除样品中和算对测定值的干扰。
EPS的含量最终以单位质量MLVSS中各成分的总量计。
DNA的测定采用修正的Brunk方法[ ],主要试剂为:用100 mM NaCl中配制0。2 ppm DAPI试剂 (4, 6-二咪基-2-苯基吲哚),10 mM EDTA,10 mM TRIS,pH 7。
步骤: 将100 µL的 EPS 提取液用吸液管装入试管中并加入2。5 ml上述试剂。直接测定样品(激发波长360nm、发射波长450 nm),Salmon实验采用标准方法。收起