包含与包涵的区别？

什么是包涵体，怎样避免包涵体的产？

包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程， 依赖于蛋白质 的折叠速率和聚集速率，并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统， 高的诱导剂浓度，相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。 除了外界因素， 包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为，而不是蛋白的通常特性，如大小， 融合标签，相对的疏水性。尽管如此，限制折叠速率的结构特性，如二硫键的形 成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤 （并不绝对， 因为有些蛋白质二 硫键的破坏并不影响其功能） ， 富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构， 当高 水平表达时， 由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境， 蛋白质容易形成错配 ...全部

  包涵体的形成是一个由许多蛋白质参与的极端复杂的动力学过程， 依赖于蛋白质 的折叠速率和聚集速率，并且与蛋白质的合成和降解程度相关。强的表达系统， 高的诱导剂浓度，相对较高的培养温度常常造成包涵体的形成。
  除了外界因素， 包涵体的形成依赖于蛋白质特异的折叠行为，而不是蛋白的通常特性，如大小， 融合标签，相对的疏水性。尽管如此，限制折叠速率的结构特性，如二硫键的形 成常常是含有二硫键蛋白质正确折叠的限速步骤 （并不绝对， 因为有些蛋白质二 硫键的破坏并不影响其功能） ， 富含二硫键的蛋白质具有更为复杂的结构， 当高 水平表达时， 由于大肠杆菌细胞质是一个偏还原性的环境， 蛋白质容易形成错配 的二硫键， 这常常是包涵体形成的主要原因。
   膜蛋白具有暴露的疏水区， 表达时 易于聚集形成包涵体，也有可能由于降解或对细胞的毒性作用使得表达水平极 低。 蛋白质的糖基化可以影响到蛋白质的折叠行为和溶解性， 当它们在原核系统 进行表达时，也容易聚集。
   防止包涵体常用的方法： 使用中等强度或弱的启动子，低温培养，有限的诱导，优化培养基条件，进行融 合表达， 与伴侣分子和折叠酶共表达， 表达定位于不同的空间， 选择突变的菌株 或其他的原核表达系统。
   增加蛋白质折叠的添加剂： 添加剂 可能的作用机制 甘油 对蛋白质具有优先的水合作用 / 增加黏度 L- 精氨酸 两亲分子 / 渗压剂 甘氨酰甜菜碱 / 山梨糖醇 对蛋白质具有优先的水合作用 阿拉伯聚糖 增加黏度 木糖醇 增加黏度 乙醇 调节极性 DMSO 调节极性 两性离子表面活性剂（ Zwitterionic deterge nts ） 保护非极性表面 Triton X-100 保护非极性表面 硫代甜菜碱类物质（ NDSBs ） 保护非极性表面 蔗糖 / 海藻糖 对蛋白质具有优先的水合作用 / 增加黏度 N- 氧化三甲胺（ TMAO ） 对蛋白质具有优先的水合作用 / 渗压剂 三氟乙醇（ TFE ） 促进二级结构的形成 低浓度盐酸胍 使部分折叠的 中间体 不稳定 / 增加天然构象蛋 白质的溶解性 低浓度尿素 使部分折叠的 中间体 不稳定 / 增加天然构象蛋 白质的溶解性 配体 稳定天然结构状态 聚乙二醇 保护熔球体（ molten globule ） / 增加黏度 需要强调的是在培养细菌时， 在培养基中加入 5 ％的乙醇可以起到一定的防止包 涵体产生的作用。
   对比另外一篇文章： 减少包涵体形成的策略 1。 降低重组菌的生长温度，降低培养温度是减少包涵体形成的最常用的方法， 较低的生长温度降低了无活性聚集体形成的速率和疏水相互作用， 从而可减少包 涵体的形成。
   2。 添加可促进重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂， 培养 E。coli 时添加高浓度 的多醇 类、 蔗糖或非代谢糖可以阻止分泌到周质的蛋白质聚集反应， 在最适 浓度范围内添加这些添加剂不会影响细胞的生长、 蛋白质的合成或运输， 其它促 重组蛋白质可溶性表达的生长添加剂还有乙醇 （诱导热休克蛋白的表达） 、 低分 子量的巯基或二硫化合物 （影响细胞周质的还原态， 从而影响二硫键的形成） 和 NaCl 。
   3。 供给丰富的培养基，创造最佳培养条件，如供氧、 pH 等。收起