异烟肼(INH)自1952年用于抗结核治疗以来,作为预防用药及结核病治疗方案的一线药物60年,对细胞内、外的结核菌均有杀菌作用,是短程化疗的主要组成药物之一,在治疗的全过程中使用。
最近研究表明结核杆菌耐INH可能与过氧化氢酶-过氧化物酶编码基因(katG)、烯酰基还原酶编码基因(inhA)、烷基过氧化氢酶还原酶编码基因(ahpC)或-酮酰基运载蛋白合成酶编码基因(kasA)改变有关,但5%〜10%耐INH分离株未发现上述基因突变。
结核杆菌耐INH分离株有一个特征就是对豚鼠的毒力减弱,而且大多数菌株耐药性越高,毒力越弱,其机制尚不清楚,需进一步研究以了解与分枝杆菌毒力有关的复杂的宿主病原菌之间的相互作用。
(l)katG基因:katG基因位于结核杆菌染色体上,含 2 223个核苷酸,G+C含量为64。 4%,其表达的过氧化氢酶-过氧化物酶是一种既有过氧化氢酶活性又有过氧化物酶活性的热稳定的酶,分子量为80kDa,在INH作用中起关键作用。
若katG缺失或突变,使过氧化氢酶-过氧化物酶活性丧失或降低,阻止INH转换成活性形式,就会导致耐INH。50%〜70%的结核杆菌耐1NH分离株katG有突变(点突变、缺失或插人),突变随机分布,但趋向分布于katG的中心部位。
证明katG突变是耐INH产生的主要分子机制。(2) inhA操纵子:INH可抑制分枝菌酸生物合成途径中的烯酰基还原酶,而阻断其合成。在结核杆菌耐INH分离株中,inhA编码基因突变发生率高低不一(0%〜65%),某些牛结核分枝杆菌、耻垢分枝杆菌耐INH突变株的inhA蛋白在 94位有一个Ser-Ala置换。
inhA编码基因突变可导致低水平耐INH。约12%的分离株inhA调节基因有突变,该突变可增加细胞内inhA浓度,而相对减少了INH的作用,其最常见突变位点是15位。某些高耐INH的分离株katG和inhA 操纵子都有改变。
这些结果进一步证明了结核杆菌耐INH katG和inhA操纵子改变有关,但这只能解释80%左右分离株的耐INH机制,还有20%左右的耐INH分离株这两个基因均无改变,可能是还存在其他耐INH机制。
(3) oxyR调节子:细菌的oXyR调节子是一种复杂的氧化-应激调节路径,它在对环境应激反应时被激活。oxyR调节蛋白在功能上是作为氧化应激的感受器和基因转录的激活,它控制解毒酶基因的表达,如过氧化氢酶-过氧化物酶的编码基因katG和烷基过氧化氢酶还原酶的编码基因ahpC 的表达。
oxyR调节子突变对大肠埃希菌、鼠伤寒沙门菌的INH敏感有影响,然而结核杆菌oxyR基因含有许多移码突变、缺失,其本质上并无活性,不表达调节蛋白,是一个假基因,与结核杆菌INH敏感性无关。
(4) kasA基因:在无上述基因突变的结核杆菌耐INH分离株中,约10%发现kasA基因有下列突变,即R121K、G269S、G312S和G387D,但18。 8%的INH敏感株也发现存在312位密码子突变,可能该位点存在基因多态性。
kasA基因突变与耐INH之间的关系还有待进一步研究。[收起]