PNH患者如何诊断?
PNH近来阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断与治疗均有一些进展,涉及到PNH的FLAER诊断、肺动脉高压以及Eulizumab和化疗治疗PNH。1、流式细胞术诊断流式细胞术是诊断PNH的金标准,可以对PNH血细胞进行定量分析。 基本原理是抗原抗体反应。最常用的是抗CD55及CD59抗体,加入流式细胞仪后可以与细胞表面CD55及CD59特异性的结合。而未被CD55、CD59结合的细胞即为PNH细胞。通过显色分析可以确定CD55ˉ、CD59ˉ的细胞数量。 随着研究的不断深入,人们已经注意到了传统的流式细胞术对于PNH克隆检测的局限性。MDS、细胞发育不全或炎症反应等都有可能导致膜蛋白的...全部
PNH近来阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断与治疗均有一些进展,涉及到PNH的FLAER诊断、肺动脉高压以及Eulizumab和化疗治疗PNH。1、流式细胞术诊断流式细胞术是诊断PNH的金标准,可以对PNH血细胞进行定量分析。
基本原理是抗原抗体反应。最常用的是抗CD55及CD59抗体,加入流式细胞仪后可以与细胞表面CD55及CD59特异性的结合。而未被CD55、CD59结合的细胞即为PNH细胞。通过显色分析可以确定CD55ˉ、CD59ˉ的细胞数量。
随着研究的不断深入,人们已经注意到了传统的流式细胞术对于PNH克隆检测的局限性。MDS、细胞发育不全或炎症反应等都有可能导致膜蛋白的缺失,如CD14、CD16、CD55、CD59等不表达,这时若还是采用传统的流式细胞术就会出现误诊的可能性。
而FLAER白细胞分析法就避免了此种情况的发生。FLAER能特异地与细胞膜上的GPI蛋白结合,在膜上形成孔洞而使细胞溶破。由于缺失GPI蛋白是PNH细胞的专有特性,可以用此法把PNH细胞和正常细胞区分开来,从而为PNH诊断提供一种简便的方法。
最近有文献报道,以FLAER为基础对粒细胞和单核细胞进行多参数分析能够检测到较小的PNH克隆,这种方法可以提高检测的阳性率。主要原理是利用PNH的粒细胞和单核细胞缺乏CD45、CD33、CD14。
在流式细胞仪中加入相应的抗体后,正常细胞可以与之结合,而PNH粒细胞和中性细胞由于缺乏相应抗原而不能与之结合,最后通过显色分析确定PNH粒细胞和中性粒细胞的数量。在此项研究中收集了536例患者,将FLAER对白细胞的分析和CD59对红细胞的分析进行了比较。
结果发现采用FLAER分析法,有63例患者检测到了PNH克隆,检出率11。收起