核酸疫苗的影响因素有哪些？

    1质粒载体和启动子的选择真核表达质粒是核酸疫苗的主体，表达载体表达抗原蛋白的能力越强，诱发宿主产生的免疫应答能力越强。不同类型的启动子／增强子、内含子序列、翻译起始序列、转录终止序列、ｍRNA的稳定性等调控元件可直接影响基因表达效率，其中启动子是影响核酸疫苗表达的最重要因素。
    RSV启动子／增强子的表达水平比SV高1000倍，CMV启动子／增强子的表达水平又比RSV高2倍。一般认为CMV是最理想的启动子。强启动子可以产生较好的免疫应答，但弱启动子可能诱导长期的持续性免疫应答。
  总之，要求用作核酸疫苗的载体必须具备以下特点：在哺乳动物细胞内能高水平的表达目的基因；本身不复制；不会整合到宿主染色体中。  ２注射途径与方法核酸疫苗免疫接种的方法主要分为三种：①可产生高转染效率的途径，如肌肉接种；②转染效率虽不高，但是经常被用于实验动物接种的途径，如皮下、腹腔内接种；③转染效率不高，但有高水平的局部免疫监视，如皮肤、呼吸道接种。
  一般地，用注射器直接注射要求DNA为10～200ug枪注射要求的ＤＮＡ量可少至亚纳克级。  Frnan用50～100ug甲型流感病毒血凝素（HA因的纯DNA于0及4周各接种一次小鼠，比较了不同的注射途径和方法对核酸疫苗的免疫效果的影响。
  结果发现静脉内、腹腔内和肌肉内合并免疫及单独肌肉内、静脉内、鼻腔内、皮内、腹腔内和皮下免疫的各组存活率分别为95%、95%、83%、76%、75%、67%和0。  说明多种途径合并注射免疫效果最好，其它依次为肌肉内、静脉内、鼻腔内、皮内和皮下接种。
  随着技术的发展，目前最为有效的核酸疫苗免疫途径是使用基因枪将DNA包被的金颗粒注入表皮。这种方法只需比普通注射法低2～3个数量级的DNA，即0。[收起]