软下疳有以下检査方法：①涂片检査，从溃疡基底或横痃取标本直接涂片显微镜检査，可见革兰阴性短棒状杆菌。但易出现假阳性及假阴性，结果不可靠。不能作为确诊依据。②分离培养，一般需两种以上不同的培养基。
③确诊试验，分离培养出现阳性菌株时，通过生化鉴定如确定为杜克雷嗜血杆菌，才能明确诊断。④聚合酶链反应检测（PCR)，此法是杜克雷嗜血杆菌的一种有效的检测方法，但由于实验条件要求较髙，目前仅作为实验研究的一种方法，不能作为临床确诊的有效方法。
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