如何进行肾穿组织免疫荧光的检查？

    

免疫荧光抗体技术是利用抗原-抗体特异性结合的原理，将荧光素标记的已知抗体与待检 的肾活检组织进行反应，根据荧光的显示情况判断肾组织内是否有与已知抗体反应的抗原存 在，以及其存在的部位。
  常用的标记荧光素有异硫氰荧光素（FITC)及四乙基罗丹明（B200， RB200)。  FITC最大吸收光谱为490〜495nm，最大发射光谱为520〜530nm，荧光呈鲜亮的黄 绿色。
  RB200最大吸收光谱为570nm，最大发射光谱为596〜600nm，荧光呈橙红色。两种荧 光素的颜色对比鲜明，可以同时进行双标记染色。
 

免疫荧光的切片染色后，经冲洗、封片后可直接在荧光显微镜下进行观察，根据各类抗体 在肾组织中沉积的部位及形态，判定其诊断意义。
    在荧光显微镜下观察时首先应该弄清当前 所观察的抗体是哪种抗体;其次应该注意观察荧光的沉积部位，即在肾小球系膜区、肾小球毛 细血管袢、肾小球基底膜或肾小管间质血管上等;再次要注意荧光分布的形状，即颗粒状、团块 状还是线条状分布，另外要注意荧光的强度。
  荧光强度的确定:±:低倍镜下不能显示，高倍镜 下似乎可见;+ :低倍镜下似乎可见，高倍镜下可见;+ + :低倍镜下可见，高倍镜下清晰可见; +++:低倍镜下清晰可见，高倍镜下耀眼;++++:低倍镜下耀眼，高倍镜下刺眼。
    

免疫荧光检查的意义则根据其分布的不同而各不相同，常见的荧光分布形式及意义简述 如下:①肾小球内的分布:肾小球内免疫复合物的沉积形成有三类，即毛细血管袢型、系膜型及 混合型。
  毛细血管袢型又分为颗粒样沉积及线条状沉积。一般而言毛细血管袢上颗粒样沉积 主要是由可溶性循环或原位免疫复合物所致，线条状沉积多为抗肾小球基底膜抗体引起，系膜 区的沉积物则主要是由难溶性或不溶性免疫复合物沉积所致。
    ②肾小管中的分布：肾小管中 免疫荧光可分布于基底膜、上皮细胞和管腔之中。管腔中主要是管型或一些其他血浆蛋白成 分，肾小管基膜上免疫荧光阳性常见于狼疮型肾炎，抗肾基底膜性肾炎及移植肾等。
  上皮细胞 胞浆中有时可见荧光染色阳性，其主要成分是上皮细胞吸收的蛋白滴。近曲小管刷状缘染色 阳性时常提示有大量蛋白尿。  ③血管上的分布：肾细、小动脉壁上常可见免疫荧光、免疫球蛋 白、C3的沉积，多见于某些以血管损害为主的全身性疾病。
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