限制酶主要来源于原核生物,是一组能水解DNA磷酸二酯键的酶限制酶主要来源于原核生物,是一组能水解DNA磷酸二酯键的酶。迄今已发现的限制酶多达数百种,分为三类。在基因工程中使用的主要是第二类。限制酶根据其来源命名。每种限制酶识别和切割的通常为4-6个核苷酸序列,称为限制性位点(restrictionsites)或切点。
限制酶切割双链DNA的方式有两种,产生的末端也有两种:第一种是交错切割,即两条链的切点不在同一水平而是相隔数个碱基,故断口产生两小段自身互补的单链,这种末端容易互补连接,称为粘性末端(cohesiveterminus);第二种为平整切割。