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聚合酶链式反应

2016-03-16 0 爱问知识人
介绍

聚合酶链式反应是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,故又称为基因的体外扩增法。PCR技术类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。


基本信息

专科分类:传染病检查

检查分类:基因检测(DNA)

适用性别:男女均适用

是否空腹:空腹

参考价格:10—100元/项


分析结果:

阴性:
正常:体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡健康状态。


阳性:
阳性提示存在某些病毒的感染。


温馨提示:
检查前注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。
正常值

体内菌群的种类和比例正常,人体处于动态平衡健康状态。


临床意义

PCR能快速特异扩增任何已知目的基因或DNA片段,并能轻易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因扩增达到纳克、微克、毫克级的特异性DNA片段。因此,PCR技术一经问世就被迅速而广泛地用于分子生物学的各个领域。

异常结果各种疾病所致的异常,例如梅毒:①一期梅毒。即硬下疳,潜伏期2~4周,外生殖器部位发生暗红色硬肿块、浅溃疡,有软骨样硬度,周围淋巴结肿大。②二期梅毒。在一期梅毒1~2个月之后,全身皮肤、粘膜发生对称泛发皮疹、斑疹、丘疹、脓疱疹等。粘膜可发生粘膜斑、扁平湿疣,传染性强。③三期梅毒。发生在感染后2~3年乃至10年,皮肤为树胶样肿,还可涉及骨、关节、心、血管,表现为主动脉炎、主动脉瓣闭锁不全和主动脉瘤等,侵及神经为脊髓痨,全身麻痹(麻痹性痴呆)等等。

需要检查的人群:疑似某种特定的疾病病人,进行分子特异性检查。



注意事项

不合宜人群: 没有。

检查前禁忌:注意正常的生活饮食习惯,注意个人卫生。

检查时要求:积极配合医生。


检查过程

PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:

①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。

②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。

③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。

PCR技术敏感性高,特异性强,操作简便、快速,在生命科学研究、食品卫生、医疗、法医及环境监测等诸多方面都具有重要的应用价值。


不适宜人群

禁忌人群:暂无特殊禁忌人群。


不良反应与风险

此项检查一般不会带来特殊并发症和危害。


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