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2016-08-16 22:10:24
病毒性肝炎的血清学检测系不直接检测肝炎病毒,而是应用 已知抗原或抗体检测血清中相应抗体或抗原的病原学检测方法。 目前,最常采用的方法是放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附试 验(ELISA)。 RIA的基本原理是标记抗原和未标记抗原对特异 性抗体的竞争性抑制反应。在RIA反应系统中,标记抗原、未 标记抗原和特异性抗体三者同时存在时...[展开]
病毒性肝炎的血清学检测系不直接检测肝炎病毒,而是应用 已知抗原或抗体检测血清中相应抗体或抗原的病原学检测方法。 目前,最常采用的方法是放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附试 验(ELISA)。
RIA的基本原理是标记抗原和未标记抗原对特异 性抗体的竞争性抑制反应。在RIA反应系统中,标记抗原、未 标记抗原和特异性抗体三者同时存在时,因标记抗原和未标记抗 原互相竞争结合特异性抗体的能力相同,当标记抗原和特异性抗 体的量固定时,则标记抗原抗体复合物的形成就受未标记抗原含 量所制约。
如反应系统中的未标记抗原含量高时,则未标记抗原 对特异性抗体的竞争能力就强,抗原抗体复合物的形成量就增 多,标记抗原抗体复合物的形成量相对减少;反之,当未标记抗 原的含量低时,未标记抗原对特异性抗体的竞争能力弱,抗原抗 体复合物
的形成量就减少。
由此可见,标记抗原抗体复合物的形
成量和未标记抗原的含量是呈一定的逆相关函数关系。 如果将各 种已知浓度的抗原和一定量的标记抗原及其抗体作用,先测得在 各种标准浓度下标记抗原抗体复合物的放射性结合率,绘成标准
竞争抑制曲线。
根据被测抗原的放射性结合率,即可计算相应的 该抗原含量。酶免疫方法的基本原理是利用酶与抗体或抗原相结 合后,既保留抗原或抗体的免疫学反应活性,又不影响酶本身的
酶学活性。 在试验过程中,酶结合物与相应的抗体或抗原特异性 的结合,在相应而又合适的酶底物的作用下,产生一种在光学显 微镜和电子显微镜下稳定可见的不溶性反应产物。
在ELISA技 术中,酶结合物与相应抗体或抗原特异性结合后,再遇酶底物
时,在酶的强烈催化作用下,原来无色的底物产生水解、氧化或
还原等化学反应,即形成有色的产物,便可用肉眼或分光光度计
定性或定量检测其含量。
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