如何人工培育蛹虫草?
1。 培养房的准备:培养房的面积5米x3米左右,其墙壁、天花板及门窗,用3厘米厚的泡沫塑料板平整地铺在上面用于隔热,在房内摆放4个长2米,宽0。7米,高2。3米的5层培养架,培养架每层上安装1个40瓦的日光灯,培养房内配备1台空调机。 2。 蛹虫草菌母菌培养:蛹虫草菌的母菌可向真菌科研部门引进,经分离后在活的蛹体上进行复壮,选择出对蚕蛹致病力强、易变成孢子的菌株培养母菌。经复壮后的菌株,按常规灭菌接种法,接种在母菌培养基上(培养基配方:葡萄糖10克、蛋白胨10克、酵母膏2克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0。 5克、琼脂20克、水1000毫升)。然后置于20T恒温下培养,经12天后即可长满培养...全部
1。 培养房的准备:培养房的面积5米x3米左右,其墙壁、天花板及门窗,用3厘米厚的泡沫塑料板平整地铺在上面用于隔热,在房内摆放4个长2米,宽0。7米,高2。3米的5层培养架,培养架每层上安装1个40瓦的日光灯,培养房内配备1台空调机。
2。 蛹虫草菌母菌培养:蛹虫草菌的母菌可向真菌科研部门引进,经分离后在活的蛹体上进行复壮,选择出对蚕蛹致病力强、易变成孢子的菌株培养母菌。经复壮后的菌株,按常规灭菌接种法,接种在母菌培养基上(培养基配方:葡萄糖10克、蛋白胨10克、酵母膏2克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0。
5克、琼脂20克、水1000毫升)。然后置于20T恒温下培养,经12天后即可长满培养基斜面。选用菌苔底部呈鲜黄色的菌株作母菌。3。 液体菌种的制作:液体菌种培养基的配方:马铃薯300克(煮汁)、葡萄糖20克、蛋白胨3克、磷酸二氢钾1克、硫酸镁0。
5克、水1000毫升。培养基配制完成后,用2000毫升的三角瓶分装,每瓶装800毫升,再进行高压灭菌60分钟,冷却后无菌操作接入母菌,置20T温度下,黑暗静止培养48小时,然后置于转速为100圈的摇床上避光振荡培养,温度控制在18X,待菌液中出现大量的菌丝球(分生孢子)后停止振荡,即可用于接种生产蛹虫草子实体,或放在冰箱中保存待用(如果用固体培养基培育的菌种,当产生分生孢子后,可挑取分生孢子放在无菌水内制成孢子悬浊液待用)。
4。 蛹虫草子实体生产:生产蛹虫草子实体,可采用人工配制的培养基作宿主,也可用蚕蛹作宿主进行培育。其方法分述如下:人工培养基法生产子实体:(1) 营养液的准备营养液配方为:葡萄糖15克、蛋白胨12克、柠檬酸铵2克、硫酸镁1克、维生素B,3片、水1000毫升,配制好待用。
(2) 人工培养基的制作与接种制作培养基用直径8厘米,高12厘米的罐头瓶,每瓶装大米30克、蚕蛹粉1。5克,再加入营养液50毫升拌匀。用聚丙烯塑料薄膜封口,橡皮圈扎口,然后尽快将罐头瓶放入常压灭菌锅进行灭菌(大米在灭菌前不能与营养液浸泡太长时间,否则会使培养基发酵酸化,直接影响产量)。
灭菌时温度达100尤后保持8小时,待温度下降后移人接种室进行接种。接种应无菌操作,每瓶接种液体菌种5~8毫升,接种后使菌种均匀分布于培养基中。(3) 子实体的培养将接种后的培养(基)瓶移人培养房摆放在培养架上。
蛹虫草菌的菌丝生长温度范围为6~301,最适生长温度为15~25。子实体最适生长温度为18~22$。可用空调机调节培养房的温度,保持在18~22丈,湿度控制在70%~80%。培养房初期以黑暗培养菌丝体,15天左右即可长满菌丝,此时打开培养架上的日光灯加强光照刺激,每天光照时间12小时,促使菌丝变黄转色,3~4天后菌丝即可由白色转为橘黄色,再过1周左右,菌丝表面形成大量橘红色的小原基,并逐渐分化成子实体,此时用针在罐头瓶的薄膜上刺5个小孔,以加强氧气的供应,保持培养房的湿度80%~90%,并加强房内的空气流通。
(4) 子实体采收从接种到子实体生长成熟大约需60天,当子实体高度达6~8厘米,表面有黄色粉末状物质出现时即可采收。采收时用自制的带弯头的锋利小铲,把子实体从基部切下,分等级后晾至5~6成干,再在烘干箱中烘烤,烤干后及时密封包装。
干燥过程及产品避免在阳光下曝晒,以保持产品鲜艳的橘红色。采收后的培养(基)瓶除去菌皮,补充营养液,可再收1次子实体。5。蚕蛹法生产蛹虫草子实体:(1) 宿主准备把家蚕或蓖麻蚕上蔟后烟熏消毒。1星期后剖开蚕茧取蛹,剔除病蛹与生长不良的蚕蛹,选取成长矫健蚕蛹作宿主,也可直接选择上蔟前的五龄蚕作宿主。
(2) 蛹虫草菌的接种将接种针尖消毒后,用接种针蘸取孢子悬浊液中的菌种,刺人蛹体接种,成功率一般可达95%以上。(3) 子实体的培育将接种后的蛹体平摊于蚕匾或竹席上,在室温下维护至蛹体形成僵蛹。
然后在僵蛹体上覆盖一层多孔材料,如碎海绵、细煤猹等,为了使长出的子实体长而硬,也可采用定向培养,即把僵蛹的头部朝上,插人多孔保温材料如碎海绵中,然后放在子实体生长最适温度18~22t,相对湿度为90%,模仿蛹虫草的天然生态环境中培养。
这样,刚接种初期使菌丝在僵蛹体内和多孔材料的黑暗条件下生长,繁殖形成菌核,进而发育成子实体(子座)。当子实体从僵蛹体头部长出后,应增强光照使子实体继续生长成棒状的子实体。(4) 子实体采收用此法生产蛹虫草,从接种到子实体成熟座需35~45天。
当子实体高度达6~8厘米,表面有黄色粉末状物质出现时即可采收。将成熟的子实体挖出洗涤,用白酒或酒精进行表面消毒,然后放在烘干箱内保持温度60T进行烘干。烘干后及时密封保存。收起