鸡传染性法氏食病的实验室诊断方法有哪些
鸡传染性法氏獎病常用的实验室诊断方法有病毒分离和鉴定、 琼脂扩散试验以及易感雏鸡接种等。(1)病原学诊断通过无菌操作采取法氏渙组织,加入无菌磷 酸盐缓冲液研磨成乳剂,离心,取上清过滤后接种鸡胚或细胞进行培养。 ①鸡胚培养。经绒毛尿渙膜接种9〜11日龄无特定抗原鸡胚,0。1mL/枚,鸡胚通常于感染后4 ~6天死亡。感染鸡胚发育阻滞、水 肿和全身出血,脾脏可能出现斑点状坏死灶和出血斑。②细胞培养。病毒能在鸡胚成纤维细胞、鸡胚法氏躲细胞及鸡 胚肾细胞上生长。 常用鸡胚成纤维细胞培养病毒,细胞悬液置37℃ 温箱在1~2h内贴壁,待24~28h长成单层,即可更换维持液,并接 种病毒。37℃温箱培...全部
鸡传染性法氏獎病常用的实验室诊断方法有病毒分离和鉴定、 琼脂扩散试验以及易感雏鸡接种等。(1)病原学诊断通过无菌操作采取法氏渙组织,加入无菌磷 酸盐缓冲液研磨成乳剂,离心,取上清过滤后接种鸡胚或细胞进行培养。
①鸡胚培养。经绒毛尿渙膜接种9〜11日龄无特定抗原鸡胚,0。1mL/枚,鸡胚通常于感染后4 ~6天死亡。感染鸡胚发育阻滞、水 肿和全身出血,脾脏可能出现斑点状坏死灶和出血斑。②细胞培养。病毒能在鸡胚成纤维细胞、鸡胚法氏躲细胞及鸡 胚肾细胞上生长。
常用鸡胚成纤维细胞培养病毒,细胞悬液置37℃ 温箱在1~2h内贴壁,待24~28h长成单层,即可更换维持液,并接 种病毒。37℃温箱培养,观察结果,70%左右的细胞出现病变时收 集病毒,进行蚀斑计数或电镜观察。
法氏遨病毒形成的蚀斑肉眼可 见,为直径约0。2mm的均匀圆斑。③病毒鉴定。常用电子显微镜负性染色法检测,若观察到对称 的二十面体病毒粒子,则为阳性。经过纯化的病毒常呈品格状排列。 而不经纯化的病毒培养物中,仅能见到散在的病毒粒子。
(2)血清学诊断因传染性法氏澳病病毒不能凝集动物红细胞, 故本病的血清学诊断方法常有有琼脂扩散试验、荧光抗体技术、酶 联免疫吸附试验、中和试验等方法。其中琼脂扩散试验操作简便、 特异性好,应用十分普遍;酶联免疫吸附试验快速、敏感、特异, 已有商品化的酶联免疫吸附试剂盒销售。
(3)回归易感动物试验选取3周龄健康无特定抗原鸡,10只,每只肛注病料上清液0。2mL,另取5只作为生理盐水对照组,肛注 生理盐水0。2mL,单独隔离词养,每天观察鸡的症状,连续观察5 天,最后解剖所有鸡只,观察病理变化。
如出现法氏囊特征性病变,即可诊断为传染性法氏遨病。收起