如何进行试管凝集试验?
进行试管凝集试验如下:(1) 被检动物血清制备。在动物采食前或停食6 h后,以无菌 操作取血7〜10 mL,盛于灭菌试管中,立即摆成斜面使其凝固,经 过10〜12 h,血清析出后用毛细吸管析出置于另一灭菌小瓶中, 立即送检。 (2) 试管凝集试验操作方法。取5只小试管,每管加入0。 5% 石炭酸生理盐水,第1只加人2。3 mL,以后4管均各加0。5 mL。 取被检血清〇。 2 mL加入第1管混匀(一般要吸吹3次),吸取 1。 5 mL弃于消毒缸内,再吸0。5 mL于第2管混匀,再从第2管 吸0。 5 mL于第3管,如此类推,到最后1管混勻后吸0。 5 mL弃于 消毒缸内。然后每管加入...全部
进行试管凝集试验如下:(1) 被检动物血清制备。在动物采食前或停食6 h后,以无菌 操作取血7〜10 mL,盛于灭菌试管中,立即摆成斜面使其凝固,经 过10〜12 h,血清析出后用毛细吸管析出置于另一灭菌小瓶中, 立即送检。
(2) 试管凝集试验操作方法。取5只小试管,每管加入0。 5% 石炭酸生理盐水,第1只加人2。3 mL,以后4管均各加0。5 mL。 取被检血清〇。 2 mL加入第1管混匀(一般要吸吹3次),吸取 1。
5 mL弃于消毒缸内,再吸0。5 mL于第2管混匀,再从第2管 吸0。 5 mL于第3管,如此类推,到最后1管混勻后吸0。 5 mL弃于 消毒缸内。然后每管加入抗原(1 : 20石炭酸生理盐水稀释) 0。
5 mL,加完各管摇匀,如此每管血清稀释倍数依次为1 = 25、1 : 50、1 : 200、1 : 400。同时设阴性、阳性血清和抗原对照,每管加抗 原0。 5 mL,使每管总量为1。 0 mL。
然后将各管置于371: 4〜10 h,再置室温18〜24 h,观察记录结果,按下列标准记录反应强度。+ + + +:管底有极显著的伞状沉淀物,上层液体完全清 亮、透明,摇荡时沉淀成片状,表示抗原100%凝集。
+ + +:管底有明显的伞状沉淀物,但上层液体稍混浊,振荡时呈小片或大片状,表示抗原75%凝集。+ +:管底有部分伞状沉淀,上层液中等混浊,振荡时呈小片 状,表示抗原50%凝集。一:液体完全混浊,不透明,管内无凝集沉积,表示抗原完全不凝集。
以出现++以上凝集血清的最大稀释度为该被检血清的凝集效价。(1) 我国布病试管法凝集实验结果判断。猪的血清于1 : 50 稀释度呈现“ + + ”或以上时,判为阳性反应;于1 : 25稀释度呈现 “ + + ”或以上时,判为可疑反应。
可疑反应的猪经3〜4周应重新 采血检查,重检仍为可疑,如猪群过去和现在都没有出现过阳性反 应时,可判为阴性;如出现过阳性反应时,则判为阳性。收起