怎样制备草鱼出血病组织浆疫苗?
(1)制备步骤其制备过程可分为以下几个步骤。
第一步:取材、称重和稀释。挑选具有明显病症的病鱼,取其 肝脏、脾脏、肾脏和病变组织,置于无菌器皿中称重、剪碎,用 0。65%氯化钠溶液稀释成0。 01〜0。 1毫克/升浓度。
第二步:匀浆、离心取上清液。用3 000转/分冷冻离心机离 心30分钟,取上清液。
第三步:加双抗和甲醛灭活,每升上清液加青霉素100万单位和链霉素1 000毫克,再加入10%甲醛1毫升,摇匀后倒入锥形瓶 里,再置于32°c恒温水浴锅中灭活72小时。
(2)制备试验灭活后的疫苗还需取样做安全试验和效价 试验。
① 安全试验在每尾健康草鱼鱼种腹腔中注射上述灭活...全部
(1)制备步骤其制备过程可分为以下几个步骤。
第一步:取材、称重和稀释。挑选具有明显病症的病鱼,取其 肝脏、脾脏、肾脏和病变组织,置于无菌器皿中称重、剪碎,用 0。65%氯化钠溶液稀释成0。
01〜0。 1毫克/升浓度。
第二步:匀浆、离心取上清液。用3 000转/分冷冻离心机离 心30分钟,取上清液。
第三步:加双抗和甲醛灭活,每升上清液加青霉素100万单位和链霉素1 000毫克,再加入10%甲醛1毫升,摇匀后倒入锥形瓶 里,再置于32°c恒温水浴锅中灭活72小时。
(2)制备试验灭活后的疫苗还需取样做安全试验和效价 试验。
① 安全试验在每尾健康草鱼鱼种腹腔中注射上述灭活疫苗 0。 2〜0。 5毫升,然后把鱼放在27°C的水缸中饲养观察15天,若无 出血病出现,证明疫苗是安全的。
② 效价试验在每尾健康草鱼鱼种腹腔中注射上述灭活疫苗 0。1〜0。 5毫升,1个月后再向每尾草鱼注射0。 2〜0。 5毫升含0。 1 毫克/升浓度的病毒悬液,放在水温为25°C〜28°C的水缸中。
另 设不注射疫苗仅注射病毒的对照组,对照观察15天。如果对照组 出现出血病,而免疫组同样发生出血病,则说明疫苗无效。若对照 组出现出血病,免疫组不发生出血病,则证明疫苗有效。最后再将 证明有效的疫苗放置于4°C的冰箱中保存备用。
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