结核分枝杆菌培养特性有哪些?
(1) 结核分枝杆菌是专性需氧菌,空气内加5% ~10%CO2可刺激其 生长,在35 ~40T范围内均可生长,最适温度35〜37^,最适pH6。4〜 7。0。生长时尚需一定湿度,固体培养基培养时需有适量的凝固水以保证培养基湿度。 (2) 结核分枝杆菌生长缓慢,在人工培养基内需15〜20小时,在 静脉感染未经免疫小鼠肺中约需15小时,在巨噬细胞内15〜20小时,在家兔角膜中为20〜22小时繁殖一代。早先的理论认为结核分枝杆 菌生长缓慢与其疏水性外层有关,因其使得营养物质难以渗入菌细胞 内。 但有研究表明,使用表面活性剂破坏疏水层后,并未明显增加生长速度,看来此因素并非导致结核分枝杆菌生长...全部
(1) 结核分枝杆菌是专性需氧菌,空气内加5% ~10%CO2可刺激其 生长,在35 ~40T范围内均可生长,最适温度35〜37^,最适pH6。4〜 7。0。生长时尚需一定湿度,固体培养基培养时需有适量的凝固水以保证培养基湿度。
(2) 结核分枝杆菌生长缓慢,在人工培养基内需15〜20小时,在 静脉感染未经免疫小鼠肺中约需15小时,在巨噬细胞内15〜20小时,在家兔角膜中为20〜22小时繁殖一代。早先的理论认为结核分枝杆 菌生长缓慢与其疏水性外层有关,因其使得营养物质难以渗入菌细胞 内。
但有研究表明,使用表面活性剂破坏疏水层后,并未明显增加生长速度,看来此因素并非导致结核分枝杆菌生长缓慢的主要原因。近年 来有学者经研究提出,结核分枝杆菌生长缓慢与其菌体依赖DNA的 RNA多聚酶缺陷有关。
在培养基中结核分枝杆菌mRNA链的增长速度仅为大肠埃希菌的1/10,对结核分枝杆菌全细胞渗出物化学分析表 明,其RNA与DNA比值也只是大肠埃希菌的1/10。上述结果提示,结 核分枝杆菌依赖DNA的RNA多聚酶缺陷限制了特异性mRNA从DNA上的转录,转录过程低效率,蛋白质合成也呈低效率,是结核分枝杆菌 生长缓慢的主要原因。
(3) 结核杆菌在大部分培养基上菌落多呈粗糙型,菌落表面干燥、 粗糖、隆起、厚、呈结节状或颗粒状,边缘薄且不规则,似菜花状,呈乳灰白色或淡黄色。牛分枝杆菌多为光滑型,在液体培养基内,从管底开始 生长,稍显颗粒状沉淀,从管壁延伸,直达培养基表面,最后在表面形成 厚膜,在Dubos吐温白蛋白培养基内则可呈均勻分散生长。
结核杆菌有毒株在液体培养基呈索状生长。在半流体培养基中形成菌膜,中层 有颗粒状生长。(4) 结核分枝杆菌营养要求较高且特殊。培养基内应含有足够的 营养成分。结核杆菌的独特特征之一是专嗜甘油作为碳源。
牛分枝杆菌利用丙酮酸盐作为碳源。天门冬氨酰胺是结核杆菌生长的最好氨源,钾、铁和磷等能促进其生长。长期以来国内外研究者为促进结核杆 菌生长,缩短培养时间达到提前分离、鉴定的目的,对结核杆菌的营养、 生理代谢、培养基进行了一系列的研究,取得了一些进展。
在固体培养基方面,以鸡蛋为基础,常用的培养基有改良罗氏培养基、酸性罗氏培 养基、小川培养基等;以琼脂为支持物,制备合成与半合成培养基。在 美国,最常用于结核杆菌研究和诊断的固体培养基之一是Middle-brooWHlO或7H11,还有Proskauer和Belk琼脂培养基。
Belk琼脂培养 基使用简便,但菌落不典型,呈扁平、露滴状,多为光滑型。收起