嵌合病毒载体的选择是什么？
嵌合病毒嵌合病毒是一种基因工程重组病毒，在制备技术上并不存在太大问题，但作为重组病毒，在安全性上还有一定的风险，在自然条件下，有病毒之间自发产生重组的例子，可能获得一些意想不到的新型病毒，比母体株毒力更强，对生物体更具有威胁性。 所以在制备嵌合病毒时，要采用已知特性的病毒株作为嵌合病毒的骨架结构，特别是多选用减毒株作为载体病毒目前黄热病毒的嵌合病毒采用的载体主要有以下几种。YF一17DD疫苗株YF一17DD是目前预防黄热病毒感染的一株减毒活疫苗】，始用于1936年，在过去的6O多年中，有超过3亿人接种过该疫苗，安全有效。 该疫苗株免疫原性很好，单剂量接种后10d内，近lo0％的接种者产...全部
嵌合病毒嵌合病毒是一种基因工程重组病毒，在制备技术上并不存在太大问题，但作为重组病毒，在安全性上还有一定的风险，在自然条件下，有病毒之间自发产生重组的例子，可能获得一些意想不到的新型病毒，比母体株毒力更强，对生物体更具有威胁性。
所以在制备嵌合病毒时，要采用已知特性的病毒株作为嵌合病毒的骨架结构，特别是多选用减毒株作为载体病毒目前黄热病毒的嵌合病毒采用的载体主要有以下几种。YF一17DD疫苗株YF一17DD是目前预防黄热病毒感染的一株减毒活疫苗】，始用于1936年，在过去的6O多年中，有超过3亿人接种过该疫苗，安全有效。
该疫苗株免疫原性很好，单剂量接种后10d内，近lo0％的接种者产生中和抗体，免疫力持久甚至能够维持终身。将YF一17DD疫苗株和原病毒株YF—Asibi进行序列比较后发现，该病毒的抗原表位多集中在E基因，构建嵌合病毒多以这一段基因作为靶基因。
这样构建的嵌合病毒中，由YF一17DD株保留的NS蛋白基因只是诱发针对该蛋白的CTLs和非中和性抗体，而不具有交叉保护性，所以嵌合病毒作为疫苗使用时不会引起一般重组病毒带来的抗载体免疫反应，即使曾经接种过YF一17DD的接痘者再接种嵌合病毒也是安全有效的，可以作为一个理想的活疫苗株嵌合病毒载体。
1989年Rice等151构建了YF一17DD的感染性克隆，为构建嵌合病毒提供了方便，目前文献中报道的有关黄热病毒嵌合株多以此病毒株作为载体病毒。已经成功构建了包括JEV、TBE、WNV、DEN等4个血清型病毒的嵌合体。
DEN一4变异株登革病毒分为4个血清型，这4型病毒结构蛋白氨基酸序列同源性高达62％-74％，并且它们之间还有很好的交叉免疫原性，一直以来，人们试图构建登革病毒的4价疫苗，Bray等从1991年开始登革病毒嵌合病毒的研究，以DEN一4814669株全长克隆作为载体，构建了包括DEN—l到DEN一3的嵌合病毒，结果发现几株病毒的毒性并没有太大改变，他们认为若能够以一个毒性低的DEN-4病毒作为载体骨架，可能会使嵌合病毒毒性下降，由于3端和5端非编码区在病毒的复制中可能也起到调控作用，他们在构建的DEN一4感染性克隆的基础上，删除其3端和5端非编码区的部分序列，结果筛选到一株减毒株，其3端去掉了3O个核苷酸，毒性降低但是免疫原性并没有改变。
用这个减毒株作为载体和其它3个血清型的登革病毒构成嵌合病毒后，果然有效地降低了病毒毒性；其后这个载体也用于构建黄热病毒属其他成员的嵌合病毒。DEN一2PDK一53减毒株该减毒株也主要是用于合成登革病毒的嵌合疫苗，2O世纪8O年代初期，泰国Mahidol实验室将4种血清型的登革病毒经过在细胞传代中后获得各自的减毒株，其中以DEN一2PDK一53减毒株减毒效果最好，免疫保护力最强最持久。
将该减毒株和野生株进行比较，发现核苷酸水平上的变异主要在非结构区，说明该病毒株和毒力有关的基因可能在非结构区，而黄热病毒属其他成员的毒力基因多位于E蛋白，这样构建的嵌合病毒减毒机制主要由供体株的毒性起主要因素，而由DEN一2PDK-53减毒株构建的嵌合疫苗毒性的减弱由供体和受体共同决定，更有利于减毒株的获得DEN一2减毒株作为嵌合病毒的载体还有另外一个好处，登革病毒4个血清型之间产生交叉免疫力，所以异型病毒的二次感染由于抗体依赖的增强作用可以导致登革出血热／登革热休克综合征(DHF／DSS)的发生，理想的登革4价疫苗诱导的免疫力要针对4种血清型病毒，有效而且要持久，其中任何一种血清型抗体的消减都有发生DHF／DSS的可能。
流行病学资料表明，DEN几个血清型感染人的概率是不同的，其中以DEN一2的感染概率最高，所以由其它几种血清型病毒诱发的免疫反应很易识别DEN一2病毒，由此DEN一2病毒诱发DHF／DSS的概率明显大于DEN—l、一3、一4；另外DEN一2病毒诱导的特异免疫力又明显弱于其它3型，所以制备以DEN一2为基础的4价疫苗和传统疫苗比较，减少了DEN—l、一3、一4的4种血清型NS3蛋白诱发的交叉免疫反应之间的干扰作用，减少了DHF／DSS的可能，同时又能有效而持久地诱导机体产生针对4种血清型的免疫反应，从而起到预防作用。
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