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外泌体蛋白质组学对样本有什么要求?

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细胞样本 细胞样本的培养基使用量取决于细胞系以及培养状况,细胞系不同外泌体的释放量有很大差别,外泌体释放量高的细胞系几毫升培养液就足够;释放量低的则需要上百毫升。一般来说一个普通的细胞系,用超离分离外泌体,预实验(摸索条件)起始培液量最好50ml以上(直接正式实验建议100-500ml)。细胞培养过程中可以使用无外泌体血清培养基培养,也可以使用含有外泌体的血清培养细胞到一定密度(70-80%),然后吸去培养液,PBS洗数次之后换无血清培液进行培养(建议无血清培养48h后收集细胞上清)。 血液样本 目前认为血清中外泌体的含量还是很高的,用促凝管或者抗凝管...查看全部>>细胞样本 细胞样本的培养基使用量取决于细胞系以及培养状况,细胞系不同外泌体的释放量有很大差别,外泌体释放量高的细胞系几毫升培养液就足够;释放量低的则需要上百毫升。一般来说一个普通的细胞系,用超离分离外泌体,预实验(摸索条件)起始培液量最好50ml以上(直接正式实验建议100-500ml)。细胞培养过程中可以使用无外泌体血清培养基培养,也可以使用含有外泌体的血清培养细胞到一定密度(70-80%),然后吸去培养液,PBS洗数次之后换无血清培液进行培养(建议无血清培养48h后收集细胞上清)。 血液样本 目前认为血清中外泌体的含量还是很高的,用促凝管或者抗凝管收集全血3000rpm 4℃ 离心10min,取上清,液氮速冻,保存于-80℃,一般需要3-5ml的血浆/血清样本。

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